موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 4:49 دقيقة • April 30th, 2023
- ابدأ بتركيب يرقة نظيفة ومخدرة تحت غطاء زجاجي مع رفع رأسها. بعد ذلك ، قم بفضح منطقة الاهتمام عن طريق دفع زلة الغطاء برفق لدحرجة اليرقة وضبط موضعها. استخدم التصوير متحد البؤر لتحديد موقع الخلايا العصبية لليرقة. حدد محورا عصبيا معينا على إحدى الخلايا العصبية المستهدفة كموقع للإصابة.
ثم قم بتعريض المحور العصبي المستهدف لليزر ثنائي الفوتون بقوة أعلى من المستخدمة في التصوير لإحداث الضرر. يتم استخدام ليزر ثنائي الفوتون نظرا لقدرته على اختراق الضرر داخل الأنسجة الحية وتوطينه بدقة مع الحد الأدنى من الضرر للأنسجة المحيطة.
أوقف التعرض لليزر على الفور عند حدوث تلف في الخلايا العصبية المستهدفة ، مما يؤدي إلى بضع المحور العصبي أو قطع المحور العصبي. أخيرا ، قم بتصوير الخلايا العصبية المصابة لعرض تنكسها وتجديدها اللاحق في النقاط الزمنية المطلوبة.
في مثال البروتوكول ، سنقوم بتركيب يرقة للفحص المجهري ، وإحداث تلف للخلايا العصبية الحسية لليرقات ، وتتبع التجديد العصبي.
- ابدأ بتخدير اليرقات. في غطاء الدخان ، ضع طبقا زجاجيا مقاس 60 ملم في طبق بتري بلاستيكي يبلغ طوله 15 سم. ثم قم بطي قطعة من المناديل الورقية وضعها في الطبق الزجاجي. ضع صفيحة أجار العنب على المنديل بعد إضافة ثنائي إيثيل الأثير.
بعد ذلك ، على شريحة زجاجية ، ضع قطرة واحدة من زيت الهالوكربون 27 في المنتصف ، وضع بقعة من الشحوم المفرغة على ك
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية