لماذا يقلل التجفيف الصحيح من التشوه في تصوير SEM؟

يقلل التجفيف من التشوه الناتج عن إزالة الغازات والمياه السائلة تحت ضغط منخفض، مما يحافظ على بنية العينة أثناء التصوير.

كيف يحسن التجفيف الكيميائي باستخدام HMDS من حفظ العينات المخصصة للمجهر الإلكتروني الماسح (SEM)؟

يحل HMDS محل الماء في العينة ويتبخر بشكل نظيف، مما يقلل من التوتر السطحي ويمنع الانهيار أو ظهور القطع الاصطناعية أثناء التجفيف.

ما هي النتائج الكمية التي تتيح إجراء مقارنة موثوقة بين عينات SEM؟

تؤدي بروتوكولات التجفيف وإزالة الماء المتسقة إلى إنتاج سمات مورفولوجية قابلة للتكرار، مما يسمح بالمقارنة الكمية للتغيرات الهيكلية عبر الظروف المختلفة.

لماذا تعتبر متطلبات التكرار مهمة في تحضير عينات SEM؟

يضمن التكرار تقليل العيوب الناتجة عن عملية التحضير، وأن الاختلافات المورفولوجية الملحوظة تعكس تباينًا بيولوجيًا حقيقيًا بدلاً من التغيرات التقنية.

ما هي قدرات التحليل الإحصائي المطلوبة قبل تنفيذ تحضيرات SEM في سير عمل الاكتشاف؟

تحتاج الفرق إلى القدرة على قياس ومقارنة المقاييس المورفولوجية عبر المكررات لتقييم الدلالة ودعم القرارات القائمة على البيانات في عملية التحقق من الهدف.

التجفيف الكيميائي: تحضير العينة البيولوجية للفحص المجهري الإلكتروني (SEM)

JoVE Encyclopedia of Experiments

علم الأحياء

0 مشاهدات • 4:17 د • April 30th, 2023

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- للبدء ، ابدأ بتجفيف عينة ثابتة وتجفيفها لتقليل تشويه العينة الناجم عن إزالة الغازات والماء السائل عند ضغط التشغيل المنخفض للمجاهر الإلكترونية الماسحة التقليدية ، SEMs.

لتجفيف العينة ، اغسلها بتركيزات متزايدة من الإيثانول في الماء حتى يتم الوصول إلى 100٪ من الإيثانول. ثم كرر هذه العملية بعامل تجفيف كيميائي في الإيثانول حتى يتم غسل العينة بعامل تجفيف نقي. انقل العينة وعامل التجفيف إلى طبق تبخير. قم بتغطيته بأقل قدر من عامل التجفيف الإضافي واتركه يجف في غطاء الدخان طوال الليل.

بعد ذلك ، قم بتركيب العينة المحضرة على الجزء العلوي من كعب المجهر باستخدام شريط لاصق من الكربون. أخيرا ، ضع الطلاء الفضي على حواف كعب الروتين ، ثم من حافة كعب الروتين إلى كل عينة ، لتقليل تراكم الإلكترونات الزائدة ، مما قد يؤدي إلى قطع أثرية غير مرغوب فيها في الصورة.

في هذه التجربة ، ذبابة الفاكهة السوداء ، يتم تحضير ذباب الفاكهة لتحليل SEM باستخدام عامل التجفيف HMDS.

- لتحضير ذبابة الفاكهة السوداء ، اغمر الذباب المخدر في 1 مليلتر من المثبت لمدة ساعتين عند 4 درجات مئوية ، مع التأكد من غمرها بالكامل.

استخدم ماصة زجاجية لإزالة المثبت. اغسل عينة ذبابة الفاكهة الثابتة في أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 1.5 مل ثلاث مرات باستخدام 1 مليلتر من 0.1 مولار فوسفات عازلة درجة حموضة 7.2 في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. استخدم ماصة زجاجية لإزالة كل غسلة، مع الحرص على عدم إزالة العينة.

ثم قم بتجفيف العينة في أنبوب ميكرو فوج ، بحجم 1 مليلتر ، باستخدام سلسلة إيثانول متدرجة لمدة 10 دقائق لكل منها. استخدم ماصة زجاجية لإزالة كل غسلة، مع الحرص على عدم إزالة العينة. احتفظ بالعينة في أنبوب الطرد المركزي الدقيق سعة 1.5 مل مع ما يكفي من الإيثانول بنسبة 100٪ لتغطيتها.

لإجراء التجفيف الكيميائي للذباب باستخدام HMDS ، أولا ، استبدل محلول الإيثانول بنسبة 100٪ بمحلول 1 إلى 2 من HMDS و 100٪ إيثانول لمدة 20 دقيقة. ثم استبدل المحلول بمحلول 2 إلى 1 من HMDS و 100٪ إيثانول لمدة 20 دقيقة. أخيرا ، استبدل هذا المحلول ب 100٪ HMDS لمدة 20 دقيقة ، ثم كرر العملية مرة واحدة.

انقل العينة ، الموجودة في أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 1.5 مليلتر و HMDS ، إلى طبق وزن من الألومنيوم يمكن التخلص منه. استبدل HMDS بنسبة 100٪ بما يكفي من HMDS الطازج بنسبة 100٪ لتغطية العينة. ضع العينة داخل طبق الألمنيوم مباشرة في غطاء دخان كيميائي حتى تجف بغطاء فضفاض ، مثل الصندوق ، لمنع الحطام من السقوط على العينة ، واتركها تجف لمدة 12 إلى 24 ساعة.

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 15 أغسطس 2026

التجفيف الكيميائي: تحضير العينة البيولوجية للفحص المجهري الإلكتروني (SEM)

نظرة عامة

مكونات الدراسة الرئيسية

مجال العلم

خلفية علمية

الغرض من الدراسة

الطرق المستخدمة

النتائج الرئيسية

الاستنتاجات

الأسئلة الأكثر شيوعاً

الأهمية الصناعية التنفيذية

التطبيقات الاستراتيجية في البحث والتطوير في مجال الأدوية البيولوجية

الاكتشاف المبكر والتحقق من الهدف

الفحص وتطوير المقايسة

الأبحاث الانتقالية وما قبل السريرية

تكامل مسار العمل والتدفق التشغيلي

الأثر التشغيلي والمؤسسي

اعتبارات التنفيذ

الأسئلة الشائعة حول الصيدلة الحيوية

مسح بروتوكولات المجهر الإلكتروني الماسح (SEM) لإشكالية النبات، طلائعيات بيضية، وعينات الفطرية

القرار فائقة الارتباطية والميكروسكوب الإلكتروني لحل التعريب البروتين في الشبكية الزرد

معالجة الجنين، قشر البيض، والثقافة الفطرية لمسح المجهر الإلكتروني

البرد الإلكترون المجهري عينة التحضير عن طريق المركزة ايون شعاع

المجهر الإلكتروني من الأنسجة متآكلة إلى تصور مصفوفة خارج الخلية

إعداد الكائنات الحية بدائية وحقيقية النواة باستخدام التجفيف الكيميائية للتحليل المورفولوجي في المسح الضوئي المجهر الإلكتروني (SEM)

إعداد العينات البيولوجية بالتجميد ذات الضغط العالي، وتعزيز النقيض ساعدت الموجات الدقيقة، والحد الأدنى راتنج التضمين لتصوير حجم

طريقة إعداد عينة من المسح الضوئي وانتقال المجهر الإلكتروني لزوائد خنفساء الخشب

تقنيات الفحص المجهري لتفسير الاستعمار الفطري في أنسجة النباتات المتغايرة والإنبات التكافلي للبذور

الجراثيم في حدائق النمل الآتيني: تصور المناظر الطبيعية الميكروبية عن طريق مسح المجهر الإلكتروني