التجفيف الكيميائي: تحضير العينة البيولوجية للفحص المجهري الإلكتروني (SEM)
موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 4:17 دقيقة • April 30th, 2023
- للبدء ، ابدأ بتجفيف عينة ثابتة وتجفيفها لتقليل تشويه العينة الناجم عن إزالة الغازات والماء السائل عند ضغط التشغيل المنخفض للمجاهر الإلكترونية الماسحة التقليدية ، SEMs.
لتجفيف العينة ، اغسلها بتركيزات متزايدة من الإيثانول في الماء حتى يتم الوصول إلى 100٪ من الإيثانول. ثم كرر هذه العملية بعامل تجفيف كيميائي في الإيثانول حتى يتم غسل العينة بعامل تجفيف نقي. انقل العينة وعامل التجفيف إلى طبق تبخير. قم بتغطيته بأقل قدر من عامل التجفيف الإضافي واتركه يجف في غطاء الدخان طوال الليل.
بعد ذلك ، قم بتركيب العينة المحضرة على الجزء العلوي من كعب المجهر باستخدام شريط لاصق من الكربون. أخيرا ، ضع الطلاء الفضي على حواف كعب الروتين ، ثم من حافة كعب الروتين إلى كل عينة ، لتقليل تراكم الإلكترونات الزائدة ، مما قد يؤدي إلى قطع أثرية غير مرغوب فيها في الصورة.
في هذه التجربة ، ذبابة الفاكهة السوداء ، يتم تحضير ذباب الفاكهة لتحليل SEM باستخدام عامل التجفيف HMDS.
- لتحضير ذبابة الفاكهة السوداء ، اغمر الذباب المخدر في 1 مليلتر من المثبت لمدة ساعتين عند 4 درجات مئوية ، مع التأكد من غمرها بالكامل.
استخدم ماصة زجاجية لإزالة المثبت. اغسل عينة ذبابة الفاكهة الثابتة في أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 1.5 مل ثلاث مرات باستخدام 1 مليلتر من 0.1 مولار فوسفات عازلة درجة حموضة 7.2 في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. استخدم م
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية