JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء
0 مشاهدات • 4:20 د • April 30th, 2023
- ذبابة الفاكهة الغدة الليمفاوية الليمفاوية السوداء هي المسؤولة عن إنتاج خلايا الدم ، أو خلايا الدم ، التي تنتشر في اليرقات الدموية الليمفاوية. لتحديد الغدة الليمفاوية ، ابحث أولا عن الوعاء الدموي الظهري ، أو القلب ، الذي يضخ الهيموليمف في جميع أنحاء الجسم. اتبع الوعاء الظهري باتجاه الرأس حتى تجد الدماغ. الغدة الليمفاوية عبارة عن بنية صغيرة متعددة الفصوص بجوار الدماغ ، تحيط بالوعاء الظهري.
للعثور على الفص الأساسي، حدد أكبر فص في الغدة. يحتوي هذا الفص على ثلاث مناطق ، تحددها مراحل مختلفة من تطور الخلايا الدموية. تحتوي المنطقة النخاعية الأقرب إلى الوعاء الدموي الظهري على خلية دموية غير ناضجة ، بينما تحتوي المنطقة القشرية على خلايا دموية ناضجة. في الطرف الخلفي من الفص الأساسي ، يمكنك العثور على مركز الإشارات الخلفي ، المكون من خلايا دموية متخصصة. الفصوص الثانوية والثالثية أصغر وليس لها مناطق محددة.
لتشريح الغدة الليمفاوية ، ستحتاج إلى مجهر تشريح ، وملقطين لمعالجة اليرقات ، ومحلول ملحي مخزن.
في هذا المثال، سنقوم بتشريح الغدد الليمفاوية لاستخدامها في الكيمياء المناعية.
- لبدء تشريح الغدة الليمفاوية ، أضف 1 مليلتر من 1x PBS إلى بئر واحد من صفيحة 24 بئرا لكل إعداد تجريبي ليتم تشريحه. بعد ذلك ، باستخدام ماصة نقل يمكن التخلص منها ، أضف قطرة واحدة من 0.1٪ PBST إلى كل بئر. ضع الطبق بشكل مسطح على الثلج. ضع وسادة تشريح نظيفة على قاعدة مجهر مجسمة مضيئة. استخدم ماصة نقل يمكن التخلص منها لوضع قطرة بنسبة 0.01٪ PBST على الوسادة.
انقل اليرقة إلى قطرة PBST للتشريح. امسك الحمم البركانية بزوج واحد من الملقط ، الجانب الظهري لأعلى ، حوالي 1/4 طول من الطرف الخلفي. باستخدام الزوج الثاني من الملقط ، أمسك بشرة مباشرة أمام الزوج الأول واسحب بشرة اليرقات برفق باتجاه الأمام ، حتى تنكشف خطافات الفم.
حرر البشرة واستخدم كلا الملقطين لتقسيم اليرقة. قم بإزالة الطرف الخلفي من قطرة PBST وتخلص منها. قم بتثبيت البشرة لأسفل لتحقيق الاستقرار ثم استخدم الزوج الثاني من الملقط للاستيلاء على خطافات الفم المكشوفة وسحبها برفق. سيؤدي ذلك إلى فصل البشرة عن الهياكل الداخلية.
الحفاظ على خطافات الفم ، وإزالة الهياكل غير المرغوب فيها بعناية ، مثل الغدد اللعابية والجسم الدهني والأمعاء. التقط مركب الأنسجة المقطعة برفق بواسطة خطافات الفم وانقله إلى بئر من اللوحة على الجليد. كرر التشريح مع أكبر عدد ممكن من اليرقات حسب الرغبة ، لكن لا تتجاوز وقت التشريح لمدة 30 دقيقة قبل المتابعة إلى خطوة التثبيت.
لبدء تركيب الأنسجة ، ضع قطرة من عازلة التثبيت على شريحة زجاجية. باستخدام خطافات الفم كمقبض ، انقل الغدة الليمفاوية إلى القطرة العازلة. باعد بين الأنسجة بالتساوي ، ونشر المخزن المؤقت المتصاعد في هذه العملية.
حرك ملقطا واحدا من الملقط بحذر أسفل الوعاء الظهري ، واسحب برفق نحو محيط المخزن المؤقت المتصاعد لسحب الغدة الليمفاوية وتسطيحها. بحركة النشر ، قم بقطع الوعاء الظهري بين الغدة الليمفاوية والدماغ. انقل باقي الأنسجة بعيدا عن الغدة الليمفاوية إلى الحافة الخارجية للمخزن العازل.
خذ زلة غطاء نظيفة وقم بخفضها بعناية على المخزن المؤقت للتثبيت. الشرائح جاهزة الآن للتصوير أو يمكن تخزينها عند 4 درجات مئوية لحين الحاجة.
تصف هذه المقالة عملية تشريح الغدة اللمفاوية في يرقات Drosophila melanogaster، والتي تلعب دوراً حاسماً في إنتاج الخلايا الدموية (hemocytes). كما يتم تفصيل بنية الغدة اللمفاوية وعملية التشريح اللازمة لإجراء الكيمياء النسيجية المناعية.
يوفر فهم إنتاج الخلايا الدموية (hemocyte) في يرقات Drosophila نموذجاً قابلاً للمعالجة وراثياً لدراسة المناعة الفطرية وتكون الدم، مما يقدم قيمة تنبؤية للتحقق من الأهداف في أبحاث المناعة والأمراض الالتهابية. يتيح بروتوكول تشريح الغدة اللمفاوية عزلاً قابلاً للتكرار لنظام ذي صلة بالمرض من أجل تقليل المخاطر الميكانيكية لمسارات تكون الدم. ويدعم هذا سير عمل الاكتشاف المبكر من خلال توفير مواد بيولوجية معيارية لتطوير المقايسات وتطبيقات الفحص.
يُعد تشريح الغدة اللمفاوية جزءاً من سلسلة الاكتشافات الممتدة من التحقق من الهدف إلى الفحص المظهري، مما يوفر نموذجاً متاحاً جينياً لأبحاث تكوين الدم.
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
آخر تحديث: 29 أغسطس 2026