JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء
0 مشاهدات • 2:01 د • April 30th, 2023
- للبدء ، ضع ماصة قطرة من المخزن المؤقت على وسادة تشريح نظيفة. ثم ضع يرقة حية مجففة على القطرة. ذبابة الفاكهة ، مثل المفصليات الأخرى ، لها نظام دوري مفتوح يضخ فيه القلب الهيموليمف حول الجسم ، ويستحم الأعضاء الداخلية. لتحرير الهيموليمف ، وهو الدم المشترك والسائل الخلالي للمفصليات ، استخدم الملقط وافتح البشرة ، الغطاء الخارجي شبه الصلب لليرقات.
بعد ذلك ، تخلص من الذبيحة وانقل محلول الهيموليمف من لوحة التشريح إلى محلول عازلة مبرد في أنبوب طرد مركزي دقيق. أخيرا ، استخدم مقياس الدم لحساب عدد خلايا الدم ، الخلايا الموجودة في الهيموليمفاد ، التي تم جمعها. في هذا البروتوكول ، سوف نجمع hemolymph من ذبابة الفاكهة يرقات melanogaster.
- ابدأ في جمع hemolymph عن طريق إضافة 10 ميكرولتر من 1x PBS إلى أنبوب الطرد المركزي الدقيق ، ووضع الأنبوب على الجليد. بعد ذلك ، ضع قطرة 10 ميكرولتر من 1x PBS على وسادة تشريح نظيفة. حدد يرقة فردية وجففها بوضعها على منديل من المناديل. ثم انقله إلى قطرة PBS على لوحة التشريح.
باستخدام الملقط ، قم بتمزيق البشرة برفق وقلبها لتحرير الهيموليمفاوية ، ثم تخلص من الذبيحة. باستخدام ماصة ، اجمع الهيموليمف من وسادة التشريح. أضف الهيموليمف إلى أنبوب الطرد المركزي الدقيق PBS المثلج ، واخلطه عن طريق سحب العينة لأعلى ولأسفل. قم بتحميل 10 ميكرولترات من العينة في غرفة مقياس الدم وأخذ قراءة التركيز.
يوضح هذا البروتوكول طريقة جمع الدم الليمفاوي (hemolymph) من يرقات ذبابة الفاكهة Drosophila melanogaster. تتضمن العملية استخدام وسادة تشريح، ومحلول منظم، ومقياس كرات الدم (hemocytometer) لتحليل تركيز الخلايا الدموية (hemocyte).
يدعم تقدير كمية الخلايا المناعية الدوارة في الكائنات النموذجية مرحلة التحقق الأولية من الأهداف من خلال تمكين تقليل المخاطر الميكانيكية للمرشحات المعدلة مناعياً. توفر هذه الطريقة نظاماً ذا صلة بالمرض لتقييم نشاط المسار المكون للدم والمسار المناعي داخل الجسم الحي. ويعزز العد الموثوق للخلايا الدموية الثقة التنبؤية في فحوصات المسح قبل السريرية.
تندرج هذه الطريقة ضمن تدفقات عمل الاكتشاف المبكرة، حيث يساهم التحديد الكمي للخلايا المناعية في توجيه قرارات التحقق من الهدف وتحديد المركبات الرائدة.
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
آخر تحديث: 29 أغسطس 2026