تشريح مركب العين والدماغ من شرانق الذباب: طريقة لعزل أنسجة الشبكية

- للبدء ، قم بتأمين خادرة ذبابة الفاكهة الظهرية أو الخلفية لأعلى. قم بإزالة الخادرة أو الطرف الأمامي للخادرة لفضح رأس. استمر في فتح الخادرة عن طريق قطع الغلاف وتقشيره. بمجرد تحريرها ، قم بتغطية الخادرة المقطعة ب PBS لتجنب الجفاف. قم بعمل قطع مقطعي نظيف عبر الصدر وقم بإزالة الجزء الخلفي من الذبيحة.

لفضح مركب العين والدماغ ، والذي يتضمن شبكية العين المتصلة بالفصوص البصرية ، ابدأ في تمزيق الظهارة من الحافة المفتوحة المقطوعة للصدر واستمر في فتح كبسولة الرأس تدريجيا. بعد ذلك ، قم بتوجيه مركب العين والدماغ بعناية بعيدا عن بقايا كبسولة الرأس.

في مثال البروتوكول ، سنرى عرضا توضيحيا لتشريح العين والدماغ العذراء المستخدم لعزل الأنسجة لإجراء تحليلات مختلفة في اتجاه مجرى النهر.

- بعد وضع ذبابة الفاكهة الشرانق على طبق تشريح أسود ، ضع قطعة جديدة من الشريط اللاصق على الوجهين على طبق التشريح بعيدا عن الشرانق واستخدم زوجا من الملقط لوضع الجانب الظهري للشرانق بعناية على الشريط.

ضع الطبق تحت مجهر استريو واستخدم الملقط لإزالة طبقة كل خادرة. استخدم مقص التشريح المجهري لتقطيع كل حالة عذراء ، مما يسمح بفتحها للكشف عن الرأس والصدر والجزء الأمامي من البطن ، وتأمين حواف حالة العذراء بالشريط على الوجهين.

اخترق بطن كل خادرة بملقط حاد وقم بإزالة الخادرة من حالة العذراء. ضع الخادرة على طبق التشريح بعيدا عن الشريط ، وقم بتغطية الخادرة ب 400 ميكرولتر من PBS المثلج. استخدم الملقط لإمساك كل واحدة من البطن ، واستخدم مقص التشريح المجهري لعمل شق مقطعي نظيف عبر الصدر ، وقطع الشرانق إلى نصفين.

باستخدام زوجين من الملقط الناعم ، أمسك الحواف المقطوعة لكل ظهارة صدرية وقم بتمزيق كبسولة الصدر والرأس تدريجيا ، مما يؤدي إلى تعريض مركب العين والدماغ في الأنسجة الدهنية المحيطة. بعد ذلك ، دون الإمساك بالأنسجة ، استخدم الملقط لتوجيه كل مركب عين ودماغ شفاف ، أبيض فاتح ، على شكل دمبل بعيدا عن بقايا كبسولة الرأس.