JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء
0 مشاهدات • 2:59 د • April 30th, 2023
- في أنبوب يحتوي على المخزن المؤقت M9 ، اجمع ما يصل إلى 150 دودة خنثى في المرحلة المطلوبة من التطور. قم بإزالة البكتيريا من الديدان عن طريق الغسيل باستخدام المخزن المؤقت M9 والطرد المركزي للعينة.
اعرض الأنبوب تحت مجهر تشريح عند إزالة المادة الطافية لمنع فقدان العينة. انقل الديدان إلى طبق زجاجي بحجم بسيط من المخزن المؤقت M9. أضف الليفاميزول لتخدير الديدان.
حدد موقع رأس الدودة والبلعوم ، أو الأمعاء الأمامية ، والتي تحتوي على هيكلين على شكل بصلة. استخدم إبرتين لقطع الدودة خلف البلعوم. تأكد من إكمال التشريح بسرعة لتجنب التأثير على الأنسجة.
بمجرد تعطيل البشرة ، يتم بثق ذراعي الغدد التناسلية أو دفعهما للخارج من الجسم بسبب الضغط الداخلي للدودة.
في هذا المثال ، سنقوم بتشريح الغدد التناسلية من الديدان البالغة لتحليل التألق المناعي.
- اختر 100 إلى 150 دودة في مرحلة النمو المرغوبة واجمعها في أنبوب طرد مركزي دقيق سعة 1.5 مليلتر يحتوي على 100 ميكرولتر من المخزن المؤقت M9. بعد ذلك ، املأ أنبوب الطرد المركزي الدقيق ب 900 ميكرولتر إضافي من المخزن المؤقت M9 وقم بالطرد المركزي عند 1,000 مرة جم لمدة دقيقة واحدة في درجة حرارة الغرفة.
تحت مجهر تشريح ، قم بإزالة 900 ميكرولتر من المخزن المؤقت M9 برفق. ثم كرر الغسيل مرتين أخريين لإزالة معظم البكتيريا المرفقة.
بعد ذلك ، باستخدام طرف ماصة دقيقة سعة 200 ميكرولتر مع تجويف واسع ، انقل الديدان في 100 ميكرولتر من المخزن المؤقت M9 إلى طبق ساعة زجاجي مسطح القاع. ثم أضف 1 إلى 3 ميكرولتر من 0.1 مولر ليفاميزول إلى الطبق وقم بتحريكه برفق. الآن ، قم بتوصيل إبرتين بقياس 25 بحقنتين لعمل أداة تشريح واحدة لكل يد.
تحت مجهر تشريح ، ضع كل إبرة أسفل كل دودة وفوقها وقم بعمل قطع دقيق على كل دودة بالقرب من البصلة البلعومية الثانية باستخدام حركة تشبه المقص. قم بقص جميع مرة واحدة على الأقل في غضون خمس دقائق حتى يظل الليفاميزول فعالا.
- من المهم جدا أن يكتمل تشريح في الطبق في أقل من خمس دقائق.
- في حالة عدم ظهور الغدد التناسلية المبثوقة ، ما عليك سوى تخطي هذا. تظهر هنا الغدد التناسلية المبثوقة المناسبة.
يفصل هذا المقال طريقة لتشريح الغدد التناسلية من الديدان الخنثوية البالغة من أجل تحليل التألق المناعي. وتؤكد هذه الإجراءات على أهمية التشريح السريع للحفاظ على سلامة الأنسجة.
تتيح تقنية التشريح هذه العزل السريع لأنسجة الغدد التناسلية من C. elegans لإجراء تحليلات الفلورة المناعية اللاحقة، مما يدعم التحقق من الأهداف في مسارات البيولوجيا التنموية. ومن خلال الحفاظ على سلامة الأنسجة عبر التشريح في الوقت المناسب، تعزز هذه الطريقة الثقة التنبؤية في فحوصات الفرز المظهري. كما أنها توفر نظاماً قابلاً للتطوير والتكرار لتقليل المخاطر الميكانيكية للأهداف المرتبطة بالخط الجرثومي في مرحلة الاكتشاف قبل السريري.
تتناسب هذه الطريقة مع سير عمل عمليات الاكتشاف المبكرة، مما يسمح بعزل الغدد التناسلية للتحقق من الهدف قبل الانتقال إلى تحديد المركبات الرائدة ودراسات الفعالية قبل السريرية.
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
فيديوهات ذات صلة
0 مرات المشاهدة
آخر تحديث: 29 أغسطس 2026