الحقن المجهري لأجنة ذبابة الفاكهة الحية: التسليم المبكر للكواشف إلى الجنين النامي

- اجمع أجنة ذبابة الفاكهة الحية وقم بإزالة مشالماتها غير الشفافة. ثم ، على غطاء زجاجي ، ضع خطا من غراء الهبتان ، وهو عبارة عن شريط لاصق مذاب في الهبتان السائل. لتتمكن من التعامل مع الأجنة المفككة الآن ، قم بمحاذاة العينات بعناية على التوالي على المادة اللاصقة.

انقل الغطاء إلى غرفة الجفاف لتجفيف الأجنة جزئيا. سيمنع هذا التسرب السيتوبلازمي أثناء الحقن أو بعده. بعد ذلك ، قم بإزالة الغطاء وقم بتغطية الأجنة بزيت الهالوكربون لمنع المزيد من الجفاف مع السماح للأكسجين بالانتشار في الأجنة.

لإجراء الحقن المجهري ، استخدم نظام الحقن المجهري على مجهر متوافق. من خلال النظر من خلال قطع العين ، حدد كل من الأجنة والإبرة المحملة مسبقا بمحلول الحقن. افتح الإبرة وتأكد من أنها تنتج قطرات سائلة متسقة وذات حجم مناسب. ثم أحضر الإبرة داخل الجنين وحقن الحجم المناسب. أخرج الإبرة ، وانتقل إلى الإبرة التالية ، وكرر الحقن للأجنة المتبقية.

في بروتوكول المثال ، سنرى عرضا توضيحيا للحقن المجهري لجنين ذبابة الفاكهة لدراسات التصوير الحي لانقسام الخلايا.

- قبل إعداد الغطاء ، قم بعمل غراء سباعي عن طريق فتح شريط لاصق مزدوج ، ووضعه في زجاجة سعة 100 مل. أضف حوالي 50 مل من الهبتان ، وأغلق الزجاجة ، وهزها لعدة أيام.

قبل تحضير الأجنة ، قم بعمل غرفة تجفيف يتم وضع الأجنة فيها قبل الحقن. للقيام بذلك ، ضع جزءا واحدا من طبق 35 ملم