تشريح الأمعاء الوسطى من ذبابة بالغة: طريقة لعزل الجهاز الهضمي

- للبدء ، قم بإزالة الرأس من ذبابة بالغة مخدرة. قم بتغطية الذبابة المقطوعة الرأس بمحلول يحتوي على محلول ملحي مخزن بالفوسفات ، أو PBS ، وألبومين مصل الأبقار ، أو BSA ، لتجنب الجفاف. أمسك الذبابة من الصدر بالملقط ، ثم اسحب البطن بزوج ثان من الملقط لفضح القناة الهضمية. نظرا لأن المحصول ، أو كيس تخزين الطعام ، سيتم ربطه بالصدر ، اسحب القناة الهضمية برفق بعيدا عن الصدر.

بمجرد فصله ، اسحب المحصول بعيدا عن البطن لفتح القناة الهضمية. اسحب الطرف الخلفي للذبابة لبدء تحرير القناة الهضمية من تجويف البطن. استمر في شد القناة الهضمية لسحب الأنسجة بأكملها من البطن. بمجرد تحريرها ، قم بإزالة الأمعاء الأمامية ، والأنابيب المالبيجي ، والأمعاء الخلفية ، والمبايض لتترك وراءها فقط الأمعاء الوسطى المقطعة ، وهي الموقع الأساسي للهضم داخل الذبابة.

في مثال البروتوكول ، سنقوم بتشريح الأمعاء الوسطى من الذباب البالغ الصغير والكبير ليتم تحليلها بشكل أكبر عبر فرز الخلايا المنشط بالفلورة ، أو FACS.

- قبل البدء في التشريح ، قم بتخدير قارورة واحدة من 40 ذبابة بثاني أكسيد الكربون على سرير ذبابة قياسي. ثم استخدم شفرة حلاقة لقطع رأس كل الذباب ونقلها إلى طبق تشريح مغطى بهلام الاغاروز. صب ما يكفي من PBS البارد بالإضافة إلى BSA في الطبق لتغطية الاغاروز. سوف يطفو الذباب.

ثم ، لكل حشرة ، بدورها ، أمسك بطن ذبابة بزوج واحد من