تغذية FITC-Dextran: طريقة لتحديد نفاذية الأمعاء في C. ايليجانس

0 مشاهدات2:56 د • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- C. ايليجانس يستخدم كنموذج تجريبي للعدوى بمسببات الأمراض المعوية التي تسبب المرض ، جزئيا ، عن طريق تعطيل الحاجز المعوي ، وزيادة نفاذيته. لتحديد سلامة الحاجز بعد التعرض لبكتيريا أو مركب كيميائي ذي أهمية ، اجمع الديدان عن طريق غسلها من أطباقها.

بعد ذلك ، ضع هذه الديدان على أطباق أجار مع طعام مصنف يتكون من الإشريكية القولونية المقتولة بالحرارة الممزوجة ب FITC-dextaren ، وهو عديد السكاريد عالي الوزن الجزيئي مع علامة الفلورسنت.

اسمح للديدان بأكل البكتيريا المصنفة. أولئك الذين يعانون من حواجز معوية سليمة سوف يزيلون الطعام بسرعة ، بينما في الديدان ذات الأمعاء الأكثر نفاذية ، سوف تخترق علامة الفلورسنت ما وراء تجويف العضو.

انقل الديدان إلى محلول الفورمالديهايد لإصلاح. بعد 1 إلى 2 دقيقة ، استبدل الفورمالديهايد بوسائط التثبيت.

أخيرا ، قم بتصوير الديدان بواسطة المجهر الفلوري. لاحظ أن C. ايليجانس حبيبات الأمعاء ذاتية الفلورسنت ، لذلك ستكون هناك إشارة خلفية. لكن بشكل عام ، يشير التألق المعوي إلى نفاذية أعلى.

في مثال البروتوكول ، سنقوم بفحص تأثير العلاج بالجزيء الحيوي DIM على نفاذية الأمعاء للديدان المصابة ببكتيريا Pseudomonas aeruginosa المسببة للأمراض.

- تحضير الألواح المكملة ب FITC-dextran عن طريق خلط 2 مل من الإشريكية القولونية المعطلة بالحرارة مع 4 ملليغرام من FITC-dextran. أضف 100 ميكرولتر من الخليط إلى كل من 20 لوح أجار NGM طازج واترك الأطباق تجف لمدة ساعة واحدة على مقعد مختبر نظيف. بعد 48 ساعة من العلاج ، اغسل الديدان باستخدام S Buffer. انقلها إلى لوحات مكملة ب FITC-dextran وإلى ألواح NGM بدون FITC-dextran واحتضان الألواح طوال الليل.

في اليوم التالي ، اغسل الديدان باستخدام S Buffer واتركها بالزحف في لوحة أجار NGM الجديدة لمدة ساعة واحدة. أضف 50 ميكرولترا من الفورمالديهايد بنسبة 4٪ إلى كل بئر من صفيحة سوداء ذات قاع مسطح سعة 96 بئرا وانقل ما يقرب من 50 دودة إلى كل بئر. بعد 1 إلى 2 دقيقة ، قم بإزالة كل الفورمالديهايد وأضف 100 ميكرولتر من وسط التركيب في كل بئر.

- الفورمالديهايد مادة كيميائية سامة ويجب التعامل معها بحذر.

12:15

الأمعاء C. ايليجانس "كنموذج" ل Morphogenesis التجويف بين الخلايا و في فيفو الاستقطاب نشوء غشاء حيوي على مستوى الخلايا المفردة: وضع العلامات تلطيخ جسم والخسارة [رني] من وظيفة تحليل وتصوير

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:04

قياس النفاذية الحاجز الظهارية في أورجانويدس المعوية البشرية في الوقت الحقيقي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

10:22

في المختبر و في فيفو النهج لتحديد نفاذية الخلايا الظهارية المعوية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:44

وظيفية تقييم الحركة المعوية والتهاب الأمعاء الجدار في القوارض: التحليلات في نموذج موحد من التلاعب المعوية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

02:45

تقييم نفاذية الأمعاء لدى C. elegans بعد التعرض للبكتيريا

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

06:04

فيفو السابقين المعوية الحويصلات لتقييم الأغشية المخاطية النفاذية في نماذج من الأمراض المعوية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:58

تحليل مفيد آثار المكملات الغذائية على وظائف الأمعاء طلائي الحاجز أثناء التجريبية التهاب القولون

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:23

قياس اثار البكتيريا والمواد الكيميائية علي نفاذيه المعوية من اليجان

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:32

نهج المجهر الداخلي القائم على تقييم نفاذية المعوية وخلية الظهارية ذرف الأداء

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:24

التقييم الوظيفي نفاذية الأمعاء والهجرة العدلية عبر الإبط في الفئران باستخدام نموذج حلقة معوية موحدة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 1 أغسطس 2026