موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء
0 مشاهدة • 3:59 دقيقة • April 30th, 2023
- للتحضير للحقن ، استخدم عود دودة لوضع مسار من زيت الهالوكربون على وسادة الاغاروز. ضع الديدان في الزيت وقم بتثبيتها عن طريق دفعها برفق على وسادة الأجار. تأكد من أن الزيت يغطي بالكامل. يسمح للأكسجين بالوصول إلى الديدان مع منع الجفاف. بعد ذلك ، ضع وسادة الاغاروز على مجهر الحقن وضع الإبرة بشكل عمودي على الدودة ، مستهدفة الطرف البعيد لذراع الغدد التناسلية.
ادفع الإبرة برفق عبر البشرة وحقن ذراع الغدد التناسلية بالحمض النووي أو المركب ذي الأهمية. يحتوي كل ذراع من ذراع الغدد التناسلية على مخلوي جرثومي يتطور إلى بويضات فردية. سيتم دمج المواد التي يتم حقنها في الغدد التناسلية البعيدة في تلك البويضات وتؤثر على الجيل التالي.
بعد حقن الديدان ، استبدل الزيت بمخزن M9 المؤقت. بمجرد أن تبدأ الديدان في الحركة ، انقلها إلى طبق أجار NGM مع طعام بكتيري. في البروتوكول التالي ، يتم استخدام طريقة الحقن المجهري للغدد التناسلية لتقديم مركب Cas9 لاستهداف وتحرير جين dpy-10.
- ابدأ بإعداد C. ايليجانس ومنصات الاغاروز كما هو موضح في بروتوكول النص. ضع وسادة حقن الاغاروز وقم بتغطية زلة على منظار التشريح. استخدم معول دودة لوضع مسار صغير من زيت الهالوكربون على طول حافة واحدة من الوسادة. بعد ذلك ، استخدم معول الدودة المطلي بالزيت لرفع العديد من الديدان من صفيحة أجار NG إلى مسار الزيت. مع وجود شعر ناعم متصل بماصة ، م
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية