وسادات الدهون الثديية المزيلة للخليات: اشتقاق هيدروجيلات المصفوفة خارج الخلية من وسادات الدهون الثديية

أولا ، ضع ضمادات دهون الثدي أو MFPs في طبق بمحلول Trypsin-EDTA واحتضانها لمدة المطلوبة لكسر التصاقات مصفوفة الخلايا. اغسل الطابعات متعددة الوظائف بالماء منزوع الأيونات وصفيها من خلال مصفاة. ضع المناديل في دورق مع شريط تقليب وأضف Triton X-100. يقلب لتحلل الخلايا دون التأثير على عوامل النمو في مصفوفة الأنسجة خارج الخلية.

صفي الطابعات متعددة الوظائف واشطفها بالماء منزوع الأيونات. انقل الأنسجة مرة أخرى إلى الدورق ، وأضف حمض الديوكسيكوليك لتحلل الخلايا المتبقية. بعد ذلك ، قم بتصفية الطابعات متعددة الوظائف وضعها في دورق يحتوي على ماء منزوع الأيونات مع البنسلين والستربتومايسين لمنع التلوث. احتضن الدورق عند 4 درجات مئوية طوال الليل.

قم بتصفية الطابعات متعددة الوظائف وضعها في دورق يحتوي على الإيثانول وحمض البيراسيتيك. يزيد حمض البيراسيتيك من صلابة المصفوفة خارج الخلية للنسجة. يقلب لبعض الوقت ويكرر خطوة الإجهاد. اغسل الطابعات متعددة الوظائف باستخدام PBS ثم بالماء منزوع الأيونات. انقل الطابعات متعددة الوظائف المصفاة إلى دورق يحتوي على البروبان 1-ol.

قلبي لبعض الوقت ، وصفي المحتويات ، واغسل الطابعات متعددة الوظائف بالماء منزوع الأيونات. جفف الطابعات متعددة الوظائف واحفظها على حرارة 80 درجة مئوية تحت الصفر. في البروتوكول التالي ، سنقوم بإجراء إزالة الخلايا من منصات دهون الثدي في الفئران.

أولا ،