موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:20 دقيقة • April 30th, 2023
- تؤدي الموجات فوق الصوتية منخفضة التردد إلى التحلل الانتقائي لخلايا ابيضاض الدم البشرية ويساعد اختبار XTT في تحديد درجة هذا الضرر. يعمل الاختبار على مبدأ أن إنزيمات الميتوكوندريا للخلايا السليمة تحول صبغة XTT الصفراء إلى مركب برتقالي يسمى الفورمازان. لبدء الفحص ، عالج الخلايا بميثيل بيتا سيكلودكسترين ، وهو عامل مستنفد للكوليسترول ، ثم قم بصوتنة الخلايا بطاقة منخفضة للحث على تلف الخلايا.
جهاز طرد مركزي لتكوير الخلايا وإضافة وسائط نمو الخلايا الطازجة إلى الحبيبات. قم بزرع الخلايا بالتركيز المطلوب في صفيحة دقيقة متعددة الآبار واحتضانها طوال الليل. الآن ، أضف محلول XTT المنشط إلى الخلايا واحتضنه حتى يتطور اللون البرتقالي في آبار الصفيحة الدقيقة. ضع اللوحة في مقياس الطيف الضوئي. قم بقياس الامتصاص من 450 إلى 500 نانومتر ثم عند 630 إلى 690 نانومتر. اطرح القيمتين للحصول على نتائج دقيقة. تشير القيمة الأعلى للامتصاص في اختبار XTT إلى النشاط العالي لإنزيمات الميتوكوندريا وزيادة قابلية الخلية للبقاء.
في الفيديو التالي ، سنوضح استخدام مقايسة XTT لتحديد فعالية الموجات فوق الصوتية منخفضة التردد في إحداث تلف الخلايا في خلايا سرطان الدم المعالجة بميثيل بيتا سيكلودكسترين.
- لتقييم جدوى الخلايا الصوتية عن طريق اختبار XTT ، قم بصوتنة الخلايا باستخدام مجموعة من نبضات مدتها ثانية واحدة ، على أساس ثانية
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية