أخذ عينات الدم المدارية الرجعية: طريقة لعزل الخلايا أحادية النواة من الجيوب الأنفية المدارية الرجعية للفأر

0 مشاهدات3:18 د • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- أولا ، أمسك الفأر المخدر من رقبته وقم بإبراز العين. أدخل أنبوبا شعريا دقيقا في القناة الإنسية للعين. اسمح للدم بالتدفق عن طريق العمل الشعري في أنبوب. انقل الدم إلى أنبوب مغطى ب EDTA واحتفظ به على الجليد. يربط EDTA أيونات الكالسيوم ، مما يمنع تخثر الدم. تقلل درجة الحرارة المنخفضة من نشاط تحلل السكر للخلايا وفرص التلوث الميكروبي.

بعد ذلك ، قم بتخفيف الدم بمخزن مؤقت يحتوي على EDTA واخلطه جيدا. أضف بعناية طبقة من محلول الفصل المناسب إلى القاع ، دون إزعاج الدم. الطرد المركزي التعليق. يجمع البوليمر الموجود في محلول الفصل خلايا الدم الحمراء والرواسب في الأسفل. الخلايا والصفائح الدموية أحادية النواة ، كونها أخف من البوليمر ، ترسب فوق التدرج البوليمري.

قم بإزالة الطبقة العليا التي تحتوي على البلازما واجمع الحلقة البيضاء غير الشفافة التي تحتوي على خلايا أحادية النواة. قم بتخفيف الخلايا باستخدام PBS وأجهزة الطرد المركزي لإزالة البلازما والصفائح الدموية المتبقية. استخدم الخلايا أحادية النواة المعزولة لمزيد من التحليل. سيوضح البروتوكول التالي عزل الخلايا أحادية النواة عن فأر متولد الولادة يتم حقنه بخط خلية سرطان الدم C1498.

- أدخل أنبوبا شعريا في القناة الإنسية لعين المصاب بسرطان الدم المخدر. سيتم سحب 100 إلى 200 ميكرولتر من الدم من الجيب الحجاجي إلى الأنبوب الشعري. قم بإزالة الأنبوب والتحكم في النزيف بالتطبيق اللطيف لإسفنجة شاش معقمة على العين. بعد ذلك ، انقل الدم إلى أنبوب EDTA وقم بتخزين الأنبوب على الجليد حتى عزل الخلية أحادية النواة.

لعزل خلايا الدم أحادية النواة ، أضف أولا PBS مكملا ب 1 مللي مولار EDTA حتى حجم نهائي يبلغ 500 ميكرولتر. ثم انقل العينة إلى أنبوب الطرد المركزي الدقيق. بعد ذلك ، استخدم حقنة سعة 1 مليلتر مزودة بإبرة قياس 30 لوضع 500 ميكرولتر من محلول الفصل تحت الدم بعناية ، مع الحرص على عدم خلط الطبقات.

افصل الخلايا عن طريق الطرد المركزي واستخدم ماصة لنقل طبقة الخلية البيضاء أحادية النواة غير الشفافة إلى أنبوب جديد لأجهزة الطرد المركزي الدقيقة. ثم اغسل الخلايا المناعية في 1 مليلتر من PBS. قم بالطرد المركزي وأعد تعليق الحبيبات في 600 ميكرولتر من المخزن المؤقت FACS للتلوين والتحليل عن طريق قياس التدفق الخلوي.

07:11

أخذ عينات الدم من الوريد الذيل الأفقي من الفئران

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:42

جمع الدم معدلة من الأوردة ذيل الفئران غير تخديره بنظام جمع الدم فراغ والنظارات المكبر

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

06:03

جمع الدم من خلال ثقب الوريد تحت الترقوة في الفئران

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:01

عزل الخلايا العقدة الشبكية الفئران الأولية (رغس) عن طريق التدفق الخلوي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

05:15

عزل مقلة العين السليمة للحصول علي الانسجه السطحية البصرية المتكاملة للفحص النسيجي والمناعي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

04:39

نموذج القوارض الوليدية لحقن الوريد خلف الحجاج

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:56

التنشيط العصبي عن بعد إلى جانب أخذ عينات الدم الآلي للحث على قياس هرمون اللوتين المتداول في الفئران وقياسه

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

05:32

في الجسم الحي نهج العظم العضوي لحصاد الخلايا الجذعية / السلفية العلاجية المكونة للدم

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

04:39

عزل خلايا مولر الدبقية الدبقية لشبكية الفأر الأولية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

05:04

طريقة مبسطة لعزل وزراعة الخلايا الظهارية الصبغية للشبكية من الفئران البالغة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 1 أغسطس 2026