موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:25 دقيقة • April 30th, 2023
- في خلايا سرطان الدم ، يتم إلغاء تنظيم نقل الجزيئات الكبيرة ، مثل عدد قليل من البروتينات المثبطة للورم بين النواة والسيتوبلازم. يؤدي التوطين الخاطئ لهذه البروتينات إلى جعلها غير نشطة ، مما يؤدي إلى نمو غير منضبط لخلايا سرطان الدم. يمكننا تحديد الموقع الشاذ لهذه البروتينات عن طريق توليد الجزء السيتوبلازمي والنووي من خلايا ابيضاض الكريات.
ابدأ بأخذ الحجم المطلوب من خلايا سرطان الدم في أنبوب الطرد الدقيق وجهاز الطرد المركزي لحبيبات الخلية. أعد تعليق الحبيبات في مخزن مؤقت للتحلل منخفض التوتر ثم أضف التركيز المطلوب من المنظف. يتسبب المخزن المؤقت للتحلل المنخفض التوتر في انتفاخ الخلايا وكسر غشاء البلازما ، مما يترك الغشاء النووي سليما ، وبالتالي عزل الكسور السيتوبلازمية. يساعد المنظف في استخراج البروتينات من العضيات السيتوبلازمية.
الطرد المركزي للخلايا المحللة في حالة تعليق ونقل المادة الطافية إلى أنبوب جديد. يحتوي المادة الطافية على الجزء السيتوبلازمي للخلية. لتحضير الجزء النووي ، قم بتعليق الحبيبات المتبقية في مخزن التحلل الكامل وأضف المنظفات. جهاز طرد مركزي وجمع الجزء النووي الموجود في المادة الطافية في أنبوب الطرد الدقيق. قم بتخزين الكسور السيتوبلازمية والنووية عند 80 درجة مئوية تحت الصفر لمزيد من التحليل. في البروتوكول التالي ، سنوضح توليد الكسور تحت الخلوية من خلايا سرطان الكريات.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية