حصاد نخاع العظام من الطرف الخلفي للفأر

- نخاع العظم هو النسيج الجيلاتيني الإسفنجي الموجود في المركز المجوف للعظام. يحتوي على خلايا جذعية مكونة للدم ، والتي تنتج خلايا الدم ، وهي مكون رئيسي في جهاز المناعة. يوفر عزل نخاع العظم عن العظام الكبيرة ، مثل عظم الفخذ والساق ، إنتاجية عالية للخلايا.

لحصاد نخاع العظام ، ضع الفأر القتل الرحيم في وضع ضعيف وقم بتعقيم الجلد باستخدام الإيثانول. قطع تجويف البطن وإزالة الجلد لكشف الأطراف الخلفية. كسر الساق ، وهو عظم طويل من الساق ، وضعه في PBS بارد للحفاظ على الظروف الفسيولوجية. خلع الرضفة وإزالة العضلات لفضح عظم الفخذ وعظم الفخذ.

اقطع عظم الفخذ من أسفل العظم وضعه في PBS بارد. قم بعمل ثقب في أنبوب طرد مركزي صغير الحجم وضع كلتا العظمتين فيه بحيث يكون الطرف المفتوح للعظام مواجها للفتحة. ضع الأنبوب الذي يحتوي على العظام في أنبوب طرد مركزي صغير الحجم أكبر وقم بالطرد المركزي للأنابيب ذات الطبقات المزدوجة لحبيبات نخاع العظام. استخدم نخاع العظم المحصود لمزيد من التحليل. في هذا البروتوكول ، سنقوم بحصاد نخاع العظم من الأطراف الخلفية للفأر.

- لحصاد نخاع العظم ، ضع فأر C57 black-6 البالغ من العمر 6 إلى 10 أسابيع في وضع الاستلقاء على وسادة جراحية معقمة واستخدم 70٪ من الإيثانول لتعقيم البطن والأطراف الخلفية. استخدم زوجا من المقصات الجراحية التشريح لفتح تجويف البطن وإزالة الجلد لكشف الأطراف الخلفية.