موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:57 دقيقة • April 30th, 2023
- تلعب الخلايا التائية ، وهي فئة من الخلايا الليمفاوية ، دورا نشطا في مكافحة العدوى. إلى جانب العديد من أنواع خلايا الدم الأخرى ، توجد الخلايا التائية ذات الكفاءة المناعية في طحال الفأر والغدد الليمفاوية. لعزل الخلايا التائية بشكل انتقائي ، قم بحصاد طحال الفئران والغدد الليمفاوية ونقعها على مصفاة الخلايا. اغسل الأنسجة بوسائط مناسبة للحصول على تعليق خلية واحدة.
أضف البوتاسيوم كلوريد الأمونيوم ، أو المخزن المؤقت ACK ، لتحلل خلايا الدم الحمراء. جهاز طرد مركزي لفصل خلايا الدم السليمة عن المحللة. تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق الخلايا في مخزن مؤقت مناسب. عالج المعلق بمزيج من الأجسام المضادة للفأر البيوتينيل لاستهداف خلايا الدم مثل الخلايا المحببة والخلايا البائية والخلايا القاتلة الطبيعية وأي كريات الدم الحمراء المتبقية. لا يتم استهداف الخلايا التائية وبالتالي تظل غير موسومة.
بعد ذلك ، أضف الميكروبيدات المغناطيسية المضادة للبيوتين إلى التعليق. ترتبط جميع الخلايا المسماة بالبيوتين بالميكروبيدات. عندما تبقى تحت تأثير مجال مغناطيسي قوي ، تلتصق الخلايا المصنفة مغناطيسيا بجدار الأنبوب. تظل الخلايا التائية غير المسماة معلقة. اجمع الخلايا التائية المخصبة غير المنضجة في أنبوب تجميع جديد. في البروتوكول التالي ، نعرض عزل الخلايا التائية عن طحال الفأر والغدد الليمفاوية ، باستخدام تقنية الفصل ال
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية