موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 4:59 دقيقة • April 30th, 2023
- الفيروسات القهقرية هي فيروسات الحمض النووي الريبي التي تتكاثر باستخدام النسخ العكسي لتحويل جينوم الحمض النووي الريبي الخاص بها إلى حمض نووي مزدوج الشريطة والاندماج بشكل دائم في جينوم المضيف. تخرج الجزيئات الفيروسية الجديدة من الخلية ويمكن أن تصيب الخلايا الأخرى. يستخدم العلاج الجيني للسرطان نواقل الفيروسات القهقرية لإدخال الجينات العلاجية في الخلايا المستهدفة عبر تقنية تسمى التنبيغ لتقليل تنظيم الجين المتحور أو القضاء على الخلايا.
للحصول على نواقل الفيروسات القهقرية عالية العيار ، قم بنقل خلايا HEK 293 بخليط تعدي يحتوي على البلازميد الفيروسي القهقري المطلوب ، وبلازميد التعبئة ، وعامل نقل مناسب. احتضان الخلايا. يسهل عامل النقل توصيل كلا البلازميدات إلى الخلايا.
يقوم البلازميد الفيروسي القهقري بتشفير الجينوم الفيروسي بالجين المستهدف بينما يقوم بلازميد العبوة بتشفير بروتينات الغلاف الفيروسي. تشكل الآلات الخلوية لخلايا التعبئة جزيئات الفيروسية القهقرية وتطلقها في الوسط. اجمع المادة الطافية الفيروسية وأجهزة الطرد المركزي لإزالة الخلايا.
انقل التركيز المطلوب للجزيئات الفيروسية والخلايا السرطانية إلى صفيحة مزرعة مغلفة بالألياف الفيبرونيكتين لتسهيل ربط بروتينات الغلاف الفيروسي بالخلايا. احتضان الخلايا. اجمع الخلايا وقم بإجراء قياس التدفق الخلوي لتحليل كفاءة التحويل. سيقوم هذا البروتوكول
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية