موسوعة JoVE للتجارب
أبحاث السرطان
0 مشاهدة • 3:31 دقيقة • April 30th, 2023
- في بعض الأحيان ، تخضع الخلية الجذعية أو السلفية لطفرات ، مما يؤدي إلى ظهور خلية جذعية سرطان الكريات. في هذه الخلايا ، يتم تنظيم بعض البروتينات ، ويمكن أن يساعد استخدام المركبات المضادة للسرطان ضد هذه البروتينات في التحكم في نمو الخلايا. يمكن تحليل تأثير هذه المركبات المضادة للسرطان باستخدام مقايسة CFU من خلال مراقبة عدد وحجم المستعمرات المتكونة.
ابدأ بأخذ الخلايا السلفية من فأر سرطان الدم وتخفيفها في وسط مزرعة مناسب. أضف معلق الخلية هذا مع المركب المناسب المضاد للسرطان إلى ميثيل السليلوز الذي يحتوي على السيتوكينات الخاصة بالفأر ، واسكبه في طبق بتري. احتضن هذا الخليط حتى تظهر المستعمرات. ميثيل السليلوز عبارة عن مصفوفة خاملة كيميائيا وشبه صلبة تمنع هجرة الخلايا بينما تحفز السيتوكينات الخلايا السلفية على التمايز وتشكيل مستعمرات تحتوي على ذرية يمكن التعرف عليها.
بعد ذلك ، قم بتلطيخ المستعمرات باستخدام كلوريد iodonitrotetrazolium ، أو INT ، واحتضانها طوال الليل حتى تتحول المستعمرات إلى اللون البني المحمر الداكن. تقلل إنزيمات الميتوكوندريا من INT ذات اللون الأصفر إلى صبغة فورمازان ذات اللون البني المحمر. أخيرا ، حدد عد المستعمرات الموجودة على اللوحة. في البروتوكول التالي ، سنقوم بإجراء اختبار CFU لاختبار تأثير المركبات المضادة للسرطان على الخلايا الإيجابية ل YFP.
- أولا ، قم بإذابة ميث
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية