الانتقاء المناعي السلبي: طريقة لتنقية الخلايا البائية من خلايا الدم المحيطية أحادية النواة

تشمل خلايا الدم المحيطية أحادية النواة أو PBMCs الخلايا البائية والخلايا التائية والخلايا القاتلة الطبيعية أو الخلايا القاتلة الطبيعية والخلايا الوحيدة. تنتج الخلايا البائية جزيئات الغلوبولين المناعي لمحاربة العدوى. في سرطان الدم ، تتكاثر هذه الخلايا وتنتقل إلى أعضاء مختلفة.

لعزل الخلايا البائية ، ابدأ بتعليق PBMCs المعزولة. أضف خليط الأجسام المضادة الأولية الموجه ضد جزيئات سطح الخلية المحددة تسمى مجموعة التمايز أو CD. ترتبط الأجسام المضادة المحددة بجزيء CD-3 على الخلايا التائية ، وجزيء CD-14 على الخلايا الوحيدة ، وجزيء CD-16 على الخلايا القاتلة الطبيعية ، مما يترك الخلايا البائية غير مسماة.

بعد ذلك ، اغسل العينة لإزالة الأجسام المضادة غير المرتبطة. أضف الميكروبيدات المغناطيسية الثانوية المترافقة بالأجسام المضادة إلى العينة. ترتبط الأجسام المضادة الثانوية بمنطقة FC للأجسام المضادة الأولية المرتبطة بخلايا معينة. ضع الأنبوب الذي يحتوي على تعليق الخلية المسمى تحت تأثير المجال المغناطيسي. في الحقل ، تهاجر الخلايا المصنفة مغناطيسيا وترتبط بجدار الأنبوب ، مما يؤدي إلى الاختيار السلبي للخلايا غير المرغوب فيها. اجمع المادة الطافية التي تحتوي على الخلايا البائية المخصبة في أنبوب تجميع جديد.

في هذا البروتوكول ، سنقوم بإجراء اختيار مغناطيسي مناعي سلبي للخلايا البائية لسرطان الدم من PBMCs لمرض