عزل خلايا T-ALL ذات العلامات الفلورية: طريقة لعزل خلايا T-ALL من أسماك الزرد البالغة

- ابيضاض الدم الليمفاوي الحاد للخلايا التائية ، أو T-ALL ، هو نوع من السرطان يحدث عندما تفشل الخلايا الليمفاوية في النضج وتبقى كخلايا غير ناضجة تسمى الخلايا الليمفاوية. هذه الخلايا غير الطبيعية غير فعالة في مكافحة العدوى. نظرا لأن هذه الخلايا غير الناضجة تنقسم بسرعة ، فإنها تفوق عدد خلايا الدم السليمة ويمكن أن تنتقل إلى أعضاء مثل الطحال والكبد والجهاز العصبي المركزي.

الأورام في الزرد تشبه تلك التي تشكلت في البشر. لذلك ، فإن سمك الزرد هو النموذج المفضل لتوليد الخلايا السرطانية T-ALL.

ابدأ باختيار الأسماك المحولة التي تظهر إشارات الفلورسنت ، مما يشير إلى انتشار الخلايا السرطانية. قم بإزالة رأس السمكة الرحيم واغسل تجويف الجسم بمحلول الهيبارين لإزالة خلايا الدم الحمراء الزائدة. الآن ، قم بحقن عازلة مناسبة في تجويف الجسم. استخدم ضغطا برفق من الخارج واجمع المخزن المؤقت الذي يحتوي على الخلايا السرطانية في أنبوب ميكروفوج.

تلطخ الخلايا باللون الأزرق وراقبها تحت المجهر. تظهر الخلايا السرطانية الحية الفلورية وعديمة اللون عند تلطيخها باللون الأزرق التايبان ، حيث يستبعد غشاء الخلية سالب الشحنة اللون الأزرق السلبي من الدخول داخل الخلية. يدخل التريبان الأزرق الخلايا الميتة من خلال الغشاء المسامي ، مما يؤدي إلى تلطيخها باللون الأزرق. في البروتوكول التالي ، سنقوم بعزل الخلايا السرطانية T-ALL المسما