JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأعصاب
0 مشاهدات • 1:30 د • March 4th, 2025
خذ أنسجة دماغية بشرية مثبتة بالفورمالين مدمجة في البارافين. يظهر النسيج الميكروبات المسببة للأمراض الموجودة داخل الخلايا وخارجها.
اغسل لإزالة البارافين ، ثم أعد ترطيب الأنسجة باستخدام تقليل تركيزات الكحول.
يسخن باستخدام عازلة حمضية لكسر الروابط المتشابكة للبروتين الناجم عن الفورمالين ، وكشف الحلقات المستضدية على البكتيريا.
احتضان مع كلوريد الأمونيوم لتحييد مجموعات الألدهيد التفاعلية المتبقية التي تشكلت أثناء التثبيت ، مما يمنع التفاعل غير المحدد مع الأجسام المضادة.
عالج بمنظف لاختراق الأغشية الخلوية ، مما يسهل اختراق الأجسام المضادة.
ضع محلول مانع لمنع ارتباط الأجسام المضادة غير المحدد.
احتضان بالأجسام المضادة الأولية التي تستهدف الميكروبات خارج الخلية وداخل الخلايا.
تطبيق الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بالفلوروفور التي ترتبط بالأجسام المضادة الأولية.
أضف صبغة ملزمة للحمض النووي الفلوري لتلطيخ النوى.
عالج باستخدام مزيل التألق الذاتي لإخماد التألق من حبيبات الفلورسنت الذاتي داخل الخلايا ، مما يقلل من إشارات الخلفية.
باستخدام الفحص المجهري الفلوري ، افحص الأنسجة للتأكد من وجود الميكروبات.