موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 1:30 دقيقة • March 4th, 2025
ابدأ ببروتينات السائل الدماغي النخاعي ، بما في ذلك ألفا سينوكلين الفسفوري ، وهو مؤشر حيوي للأمراض التنكسية العصبية.
أضف مخزن تخزين مؤقت يحتوي على منظف وعامل اختزال وصبغة تتبع.
قم بتسخينها لتشويه البروتينات ، ثم قم بتحميلها في جل SDS-PAGE.
إجراء الرحلان الكهربائي لفصل البروتينات حسب الوزن الجزيئي إلى نطاقات متميزة.
احتضان الجل في عازلة نشاف مع التحريض.
ثم ، قم بنقل عصابات البروتين كهربائيا من الجل إلى الغشاء.
عالج الغشاء بمثبت للاحتفاظ بالبروتين على الغشاء ، ثم اغسله.
احتضان بمحلول مانع يحتوي على أجسام مضادة أولية ومثبطات فوسفاتيز للحفاظ على فسفرة ألفا سينوكلين.
تتفاعل الأجسام المضادة حصريا مع ألفا سينوكلين الفسفوري ، وتمنع الكواشف الحزمة مواقع التفاعل غير المحددة ، ثم تغسل.
أدخل الأجسام المضادة الثانوية المترافقة بالإنزيم التي تتفاعل مع الأجسام المضادة الأولية ، ثم اغسلها.
أضف ركيزة كيميائية ، تتفاعل مع الإنزيمات وتولد تلألؤ كيميائي.
يؤكد شريط التلألؤ الكيميائي وجود ألفا سينوكلين الفسفري.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية