موسوعة JoVE للتجارب
علم الأعصاب
0 مشاهدة • 1:23 دقيقة • March 4th, 2025
خذ قسما معاد ترطيبه من أنسجة المخ البشرية المريضة التي تحتوي على أجسام ليوي ، أو LBs.
احتضان بمحلول بيروكسيد الهيدروجين لتثبيط البيروكسيديز الداخلي ومنع التلوين غير المحدد.
قم بتسخين القسم في مخزن السترات المؤقت لكشف حواتم ألفا سينوكلين في LBs.
ضع عامل مانع لمنع ارتباط الأجسام المضادة غير المحدد.
قم بإزالة عامل الحجب الزائد واحتضان القسم بالأجسام المضادة الأولية التي تستهدف ألفا سينوكلين.
اغسل الأجسام المضادة غير المرتبطة.
استخدم الأجسام المضادة الثانوية البيوتينيل التي ترتبط بالأجسام المضادة الأولية.
إزالة الأجسام المضادة الزائدة.
أضف مجمعات الستربتافيدين-البيوتين-بيروكسيداز، التي ترتبط بالأجسام المضادة الثانوية الحيوية.
اغسل المجمعات غير المقيدة.
ضع ركيزة منتجة للألوان تتفاعل مع البيروكسيديز ، وتشكل رواسب بنية.
قم بإزالة الركيزة الزائدة.
عالج بقعة مضادة لتلوين النوى باللون الأزرق ، مما يعزز التباين مع ألفا سينوكلين الملون باللون البني داخل LBs في السيتوبلازم العصبي تحت المجهر.