JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأعصاب
0 مشاهدات • 1:29 د • March 4th, 2025
ابدأ بشريحة دماغية غنية بالخلايا العصبية الدوبامينية.
احتضان الشريحة في aCSF التي تحتوي على ناقلات عصبية كاذبة فلورية أو FFNs.
FFNs هي علامات حساسة للأس الهيدروجيني تحاكي الدوبامين والتألق بشكل مكثف في البيئات المحايدة من البيئات الحمضية.
تدخل FFNs هذه بشكل انتقائي الخلايا العصبية الدوبامين ويتم تحميلها في حويصلات متشابكة حمضية ، حيث يقلل تغيير الأس الهيدروجيني من تألق FFN.
انقل هذه الشريحة إلى غرفة التصوير ، وقم بتثبيتها ، وقم بتثبيتها باستمرار باستخدام aCSF لإزالة FFNs غير المرتبطة.
قم بتصوير الشريحة لتأكيد تراكم FFN على أنه نقط فلورسنت.
بعد ذلك ، ضع قطبا محفزا لتوصيل التحفيز الكهربائي.
تتسبب النبضات الكهربائية في دخول الكالسيوم إلى الخلايا العصبية ، مما يؤدي إلى اندماج الحويصلة المشبكية مع الغشاء العصبي وإطلاق FFNs في الشق المشبكي خارج الخلية.
في بيئة الأس الهيدروجيني المحايدة للشق المشبكي ، يزداد تضان FFN.
قم بتصوير الشريحة مرة أخرى لملاحظة التألق المنتشر في الفضاء خارج الخلية ، مما يؤكد إطلاق FFN من الحويصلات المتشابكة.