JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأعصاب
0 مشاهدات • 1:28 د • March 4th, 2025
ابدأ بالسائل النخاعي ، أو CSF ، الذي تم جمعه من أفراد من مختلف الأعمار.
الطرد المركزي للعينة لحبيبات الحطام الخلوي وجمع المادة الطافية.
يحتوي المادة الطافية على بروتينات تشارك في توليد الخلايا العصبية أو تكوين الخلايا العصبية.
خذ صفيحة متعددة الآبار مغطاة بالستربتافيدين. أضف عامل حظر لمنع الربط غير المحدد.
أضف الأجسام المضادة الملتقطة المسماة بالبيوتين الانتقائية للبروتينات المحددة المرتبطة بتكوين الخلايا العصبية.
احتضن بالتحريض لربط الأجسام المضادة بالستربتافيدين ، ثم اغسل اللوحة.
أضف عينة السائل الدماغي النخاعي جنبا إلى جنب مع الأجسام المضادة للكشف المسمى بالروثينيوم إلى الآبار ، ثم احتضنها بالتحريض.
ترتبط البروتينات المحددة المرتبطة بتكوين الخلايا العصبية لالتقاط الأجسام المضادة والتفاعل مع الأجسام المضادة للكشف في وقت واحد.
اغسل اللوحة جيدا وأضف مخزن مؤقت للكشف.
ضع اللوحة في نظام التصوير.
يؤديالمخزن المؤقت للكشف إلى انبعاث الضوء من الروثينيوم.
يشير انخفاض شدة الضوء عبر العينات إلى انخفاض مرتبط بالعمر في مستويات البروتين المرتبط بتكوين الخلايا العصبية ، مما يؤكد انخفاضا في تكوين الخلايا العصبية.