ما هي الجسيمات خارج الخلية؟

الجسيمات خارج الخلية (EVs) هي جسيمات نانوية تطلقها الخلايا تحمل جزيئات حيوية مختلفة.

لماذا يتم استخدام خلات الأورانيل في هذه الطريقة؟

يتم استخدام خلات الأورانيل لتلطيخ EVs، مما يعزز تباينها لتحسين التصوير تحت TEM.

ما هي أهمية استخدام TEM؟

يوفر TEM صورًا عالية الدقة، مما يسمح بفحص مفصل لشكل EVs وحجمها.

كيف يتم تحضير EVs للتصوير؟

يتم تركيز وتنقية EVs قبل تطبيقها على شبكة TEM للتصوير.

هل يمكن استخدام هذه الطريقة لـ EVs من الكائنات الحية الأخرى؟

نعم، يمكن تعديل الطريقة لـ EVs من مصادر بيولوجية مختلفة.

تصور الحويصلات خارج الخلية للبكتيريا الزرقاء باستخدام المجهر الإلكتروني للإرسال

JoVE Encyclopedia of Experiments

Microbiology

0 views • 2:01 min • August 29th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ضع مجهريا إلكترونيا رسميا مطلي بالراتنج من البولي فينيل أو شبكة TEM على فيلم بلاستيكي نظيف.

أضف تعليقا من الحويصلات المركزة والنقية خارج الخلية أو المركبات الكهربائية ، الجسيمات ذات الحجم النانوي المرتبطة بالغشاء ، على الشبكة.

تفرز هذه المركبات الكهربائية بواسطة البكتيريا الزرقاء وتحمل جزيئات كبيرة داخل أغشيتها.

احتضان الشبكة للسماح للمركبات الكهربائية بالامتصاص على سطحها المطلي بالراتنج.

المس حافة الشبكة بورق ترشيح نظيف لامتصاص التعليق الزائد.

قم بتعويم الشبكة على أسيتات اليورانيل لتلطيخ الحويصلات الملتصقة.

يحيط أسيتات اليورانيل بالحويصلات ، مما يخلق مخططا داكنا يعزز التباين أثناء التصوير.

قم بإزالة الشبكة واستخدم ورق الترشيح لامتصاص البقعة الزائدة.

اغسل الشبكة بالماء فائق النقاء لإزالة أي بقعة متبقية. كرر الغسيل ثم اتركه حتى يجف في الهواء.

أخيرا ، تصور المركبات الكهربائية باستخدام TEM لتقييم مورفولوجيتها وحجمها ونقاوتها.

ضع بعناية خمسة ميكرولترات من الحويصلة واتركها لمدة خمس دقائق. قم بإزالة العينة عن طريق لمس حافة الشبكة بقطعة من ورق الترشيح النظيف.

ماصة 20 إلى 50 ميكرولتر من أسيتات اليورانيل 2٪ على سطح مستو مغطى بغشاء بلاستيكي. ثم ضع الشبكة تطفو فوقها لمدة دقيقتين. قم بإزالة أسيتات اليورانيل باستخدام ورق الترشيح وتطفو لفترة وجيزة على قطرة من الماء فائق النقاء لغسلها.