عزل الحويصلات خارج الخلية المحتوية على سيدروفور من المتفطرة السلية

خذ مزرعة المتفطرة السلية المزروعة في وسط يحد من الحديد لتعزيز إفراز الحويصلات خارج الخلية التي تحتوي على سيدروفورات ، مخلب حديد.

جهاز طرد مركزي لحبيبات البكتيريا.

اجمع المادة الطافية وقم بتصفيتها لإزالة البكتيريا المتبقية.

انقل المرشح إلى نظام الترشيح الفائق المقلوب والفلتر لإزالة الوسائط الزائدة وتركيز المركبات الكهربائية.

الطرد المركزي المركز لحبيبات الحطام الخلوي.

انقل المادة الطافية إلى أنبوب الطرد المركزي الفائق وجهاز الطرد المركزي لتجميع حبيبات EV.

تخلص من المادة الطافية ، وأعد تعليق الحبيبات في مخزن مؤقت ، واخلطها مع وسط تدرج كثافة مركز لتشكيل الطبقة السفلية.

تراكب مع تركيزات متناقصة لوسط التدرج لإنشاء تدرج كثافة متقطع.

أضف المخزن المؤقت في الأعلى وجهاز الطرد المركزي. تهاجر المركبات الكهربائية إلى الطبقة التي تتناسب مع كثافتها الطفوية.

اجمع كل جزء في أنبوب منفصل.

الجزء المنقى مع المركبات الكهربائية المحتوية على siderophore جاهز للدراسات النهائية.

انقل المزرعة إلى خمسة أنابيب طرد مركزي مخروطية سعة 225 مليلتر وأجهزة طرد مركزي عند 2,850 مرة جم لمدة سبع دقائق عند 20 درجة مئوية. اجمع المادة الطافية المزرعة باستخدام ماصة 50 مل وقم بتعقيمها من خلال مرشح 0.22 ميكرون.

لعزل MEVs ، انقل ترشيح المزرعة إلى نظام ترشيح فائق للخلية المقلوبة يوضع عند أربع درجات مئوية وقم بتصفية التركيز عند ضغط أقل من 50