اختبار المحور الضوئي للبكتيريا الزرقاء الخيطية باستخدام إضاءة الضوء المركزة

ابدأ بطبق يحتوي على ثقافة البكتيريا الزرقاء الخيطية الموضوعة فوق نافذة صغيرة مزودة بحامل مثبت على LED في غرفة مظلمة.

يضيء مؤشر LED الطبق من الأسفل ، مما يخلق منطقة إضاءة صغيرة.

أثناء الحضانة ، تهاجر البكتيريا الزرقاء الخيطية نحو المركز المضيء ، مما يدل على المحور الضوئي.

بمرور الوقت ، تهاجر البكتيريا الزرقاء وتتراكم في المركز المضيء ، وتشكل منطقة بكتيرية كثيفة بشكل واضح.

بعد الحضانة ، ضع ورقة بيضاء أسفل الطبق لتعزيز التباين.

التقط صورة للمنطقة المضيئة وقم بتحليلها باستخدام البرنامج.

ارسم خطا عبر الطبق الذي يمر عبر مركز المنطقة البكتيرية لإنشاء ملف تعريف شدة البكسل.

قارن متوسط شدة البكسل خارج المنطقة البكتيرية وداخلها.

بعد ذلك ، ارسم خطا بأقصى كثافة داخل المنطقة الوسطى لتحديد قطر المنطقة البكتيرية ، والتي تمثل الانجذاب الضوئي للبكتيريا الزرقاء.

قم بإعداد حوامل LED حيث يتم تركيب مصابيح LED ذات الخمسة ملليمترات لإشعاع مساحة 20 ملم مربع من الأسفل إلى الأعلى. قياس وضبط شدة LED. تأكد من أن الإعداد بأكمله في غرفة مظلمة أو حاوية مغلقة ومظلمة.

ضع ثمانية ملليلتر من الوسط الذي يحتوي على P. lacuna في طبق Petri بطول ستة سنتيمترات ، وأغلق طبق Petri بالغطاء ، وضعه على حامل LED بحيث يكون LED في وسط طبق بتري. بعد يومين عادة ، التقط صورة لطبق بتري بكاميرا هاتف ذكي تستهدف مباشرة موضع المعالجة الضوئية. استخدم حاملا وورقة بيضاء كخلفية لضمان نفس المسافة وظروف الإضاءة لكل صورة.

افتح برنامج ImageJ ، وانقر فوق ملف ، وفتح ، وحدد الملف. ثم انقر فوق Enter. حدد الزر المستقيم واضغط على زر الماوس الأيسر لرسم خط من أحد طرفي طبق Petri إلى الطرف الآخر.

تأكد من أن الخط يمر عبر مركز دائرة الخيوط. انقر فوق تحليل وقياس لمعرفة طول طبق بتري. ثم انقر فوق تحليل ورسم الملف الشخصي في قائمة ImageJ.

تقدير متوسط قيمة شدة البكسل خارج الدائرة وقيمة متوسطة أخرى لكثافة البكسل داخل الدائرة. وجه الماوس على موضع Y بين هاتين القيمين لتقدير قيم X لكلا طرفي الدائرة. لاحظ كلتا القيمتين واحسب الفرق.

ثم حدد الزر المستقيم وارسم خطا عند القيمة القصوى المتوسطة لكثافة البكسل. أخيرا ، انقر فوق تحليل ثم قياس للحصول على طول دائرة الخلية الداخلية.