تصوير الفاصل الزمني الفلوري لدورة حياة Streptomyces venezuelae
موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 5:46 دقيقة • September 26th, 2025
خذ صفيحة موائع دقيقة بها بئر تحتوي على جراثيم من Streptomyces venezuelae ، وهي بكتيريا مكونة للخيوط.
تحتوي الآبار المعينة الأخرى إما على وسط غني بالمغذيات أو متوسط مستهلك.
تشتق الجراثيم من سلالة تعبر عن بروتينات DivIVA و FtsZ الفلورية ، والتي تتشكل في أطراف الخيط والجدران المتقاطعة ، على التوالي.
ضع زيت الغمر على العدسة الشيئية للمجهر المقلوب وعلى نافذة تصوير اللوحة.
قم بتركيب اللوحة على مرحلة المجهر وابدأ التصوير بفاصل زمني.
قم بتحميل الجراثيم في غرفة زراعة اللوحة.
بعد ذلك ، أدخل الوسط الغني بالمغذيات لبدء إنبات الأبواغ.
مع نمو الخيوط ، يتراكم DivIVA عند أطراف الخيوط ، بينما يشكل FtsZ حلقات متناثرة عند الجدران المتقاطعة.
بعد ذلك ، قم بالتبديل إلى الوسيط المستهلك. نقص العناصر الغذائية في هذا الوسط يدعم التبويض.
في الخيوط المنبتة ، تختفي بؤر DivIVA ، ويعيد FtsZ التنظيم في سلم منتظم من حلقات التقسيم ، مكونا حواجز الأبواغ.
بمرور الوقت ، يؤكد اختفاء مضان FtsZ في نفس الخيوط اكتمال الأبواغ.
قم بتسخين الغرفة البيئية مسبقا إلى 30 درجة مئوية مقدما.
ثم قم بتشغيل المجهر وبرنامج التحكم في المجهر. ضع هدفا عاليا لغمر الزيت بفتحة عدسة عددية عالية في مكانه وتأكد من أن المرشحات المناسبة والمرايا التخطيطية التي تم تعيينها للحصول على صور تباين التداخل التفاضلي ، جنبا إلى جنب مع صور اندماج الفلورسنت الأصفر والبرو
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية