اختبار الحضانة لدراسة التفاعلات التنافسية بين السلالات البكتيرية

ابدأ بسلالتين بكتيريتين ، مرجع ومنافس ، كل منهما يعبر عن علامة فلورسنت مميزة لتحديد السلالة.

اخلطي السلالات بنسب متساوية وضعي الخليط على طبق أجار.

احتضن اللوحة للسماح للسلالات بالنمو والتفاعل.

يتفوق المنافس على السلالة المرجعية من خلال آليات تعتمد على الاتصال أو آليات مستقلة عن الاتصال.

في المنافسة المعتمدة على التلامس ، يستخدم المنافس أنظمة إفراز متخصصة لتوصيل السموم مباشرة إلى السلالة المرجعية.

في المنافسة المستقلة عن التلامس ، يطلق المنافس السموم التي تنتشر في الوسط المحيط وتدخل السلالة المرجعية.

تعطل هذه السموم العمليات الأساسية في السلالة المرجعية ، بما في ذلك تخليق جدار الخلية ، وتكرار الحمض النووي ، وتخليق البروتين ، مما يؤدي إلى توقف النمو وموت الخلايا وتقليل التعبير الفلوري.

بعد الحضانة ، افحص اللوحة تحت مجهر مضان.

يشير التألق المنخفض في السلالة المرجعية ، مقارنة بالتألق الأكثر إشراقا للمنافس ، إلى تفاعلات تنافسية.

لخلط السلالة المرجعية والسلالة المنافسة بنسبة واحد إلى واحد ، أضف 100 ميكرولتر من كل سلالة طبيعية إلى OD 1.0 إلى أنبوب طرد مركزي 1.5 مليلتر ودوامة لمدة ثانية إلى ثانيتين. كعنصر تحكم ، امزج السلالة المرجعية مع نسخة ذات علامات تفاضلية من نفسها والدوامة أيضا.

من الأهمية بمكان تحقيق نسبة البداية الصحيحة لأنها يمكن أن تغير بشكل كبير نتيجة التجربة. لضمان النجاح ، قد تتطلب هذه ا