موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:30 دقيقة • September 26th, 2025
للكشف عن مقاومة البكتيريا في سلالات الطماطم المختلفة ، ابدأ بشتلات الطماطم البالغة من العمر 10 أيام المزروعة في ظروف معقمة.
تعرض هذه الشتلات أوراقا حقيقية ناشئة وجذورا راسخة.
غمر كلتا السلالتين بالبكتيريا المسببة للأمراض الممزوجة بمادة خافضة للتوتر السطحي لتسهيل الانتشار المنتظم للتلقيح على سطح النبات. قم بإمالة اللوحة وحفيفها لزيادة ملامسة الشتلات مع اللقاح.
قم بإزالة اللقاح الزائد ، وأعد إغلاق الألواح ، واحتضانها في غرفة النمو.
تدخل البكتيريا من خلال الثغور وتستعمر الأبوبلاست ، وهي المساحة خارج الخلية بين خلايا الأوراق.
تقوم البكتيريا بحقن بروتينات المستجيبة في الخلايا النباتية لقمع الاستجابات المناعية للنبات.
تفشل السلالات الحساسة في اكتشاف هذه المؤثرات ، مما يسمح بتكاثر البكتيريا وتلف الأنسجة النباتية الناجم عن السموم البكتيرية.
تتعرف السلالات المقاومة على المستجيبات وتنتج أنواعا تفاعلية من الأكسجين لقتل البكتيريا.
بعد الحضانة ، تظهر السلالات المقاومة نموا مستداما ، بينما تظهر السلالات الحساسة نموا متوقفا.
انقل الألواح التي تحتوي على الشتلات البالغة من العمر عشرة أيام من غرفة النمو إلى خزانة السلامة الحيوية وقم بإزالة الشريط الجراحي. ثم نقل ستة ملليلتر من اللقاح إلى كل لوحة.
ادفع الشتلات برفق إلى اللقاح بطرف ماصة وابدأ مؤقتا لمدة ثلاث دقائق. أمسك طبقا واحدا في كل يد وقم بإمالة الجزء الأمامي من اللوحة لأسفل لغمر النبتات وأوراق الشتلات. حرك اللقاح من جانب إلى آخر من خمس إلى سبع مرات ، ثم اقلب الألواح للخلف لتغطية الجذور باللقاح.
قم بإمالة الألواح لأسفل مرة أخرى وكرر الدورة لمدة ثلاث دقائق. اسكب اللقاح من الألواح ، وضعه على سطح مستو ، واسكب أي لقاح متبقي للمرة الثانية. أعد لف الألواح ووضعها مرة أخرى في غرفة النمو.