موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:45 دقيقة • September 26th, 2025
خذ رقائق الموائع الدقيقة مع غرف النمو والأدوية مفصولة بصمام ميكانيكي دقيق.
قم بتحميل سلالات الإشريكية القولونية الطافرة من النوع البري والمقاومة ل TMP ، المعلقة في الوسط ، في غرف النمو باستخدام الضغط ، حيث يكون تريميثوبريم (TMP) هو المضاد الحيوي الذي تم اختباره.
بعد ذلك ، قم بتحميل غرف الدواء بوسائط تحتوي على تركيز منخفض من TMP للحث على الإجهاد الخلوي في البكتيريا.
قم بتشغيل الصمام الميكانيكي الدقيقي للسماح بانتشار TMP في غرف النمو ، مما يتيح دخول TMP إلى البكتيريا.
ضع الرقائق داخل الحاضنة المثبتة على مرحلة المجهر المقلوب وابدأ التصوير بفاصل زمني.
في النوع البري الإشريكية القولونية ، يرتبط TMP بإنزيم اختزال ثنائي هيدروفولات ، مما يمنع ارتباط ثنائي هيدروفولات ويسبب خيوطا ناتجة عن الإجهاد ويقلل من التكاثر البكتيري.
ومع ذلك ، فإن بنية DHFR المتغيرة للسلالة المتحولة تمنع ارتباط TMP ، مما يسمح بالتكاثر الطبيعي.
راقب صور الفاصل الزمني.
الإشريكية القولونية من النوع البري تظهر خيوطا وتكاثر منخفض تحت علاج TMP ، بينما تظهر السلالة المتحولة مورفولوجيا وتكاثر طبيعيين ، مما يشير إلى مقاومة المضادات الحيوية.
بعد إذابة العينة المجمدة يوميا في درجة حرارة الغرفة لمدة خمس دقائق ، قم بتلقيح أنبوب اختبار جديد بوسط M9 جديد.
ضع العينة في حاضنة اهتزاز على حرارة 37 درجة مئوية طوال الليل. في اليوم التالي ، استخدم وس
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية