JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدات • 2:46 د • September 26th, 2025
ابدأ بزراعة سائلة من Sporosarcina pasteurii في وسط غني بالمغذيات.
خذ محلول مخزون تخصيب يحتوي على اليوريا وكلوريد الكالسيوم وكلوريد الأمونيوم وبيكربونات الصوديوم.
أضف جزءا من وسط التخصيب إلى أنبوب الاستزراع البكتيري.
دوامة الأنابيب لخلط الخلايا البكتيرية والمواد المغذية بشكل موحد.
احتضان الثقافات المخصبة في حاضنة غير مهتزة.
تنتج Sporosarcina pasteurii ، وهي بكتيريا تربة موجبة الجرام ، إنزيم اليورياز في وجود اليوريا.
يكسر اليورياز اليوريا إلى أيونات الأمونيوم والكربونات.
يساعد كلوريد الأمونيوم وبيكربونات الصوديوم في الحفاظ على درجة الحموضة القلوية التي تدعم ترسيب المعادن.
تتفاعل أيونات الكربونات مع أيونات الكالسيوم من كلوريد الكالسيوم لتكوين كربونات الكالسيوم غير القابلة للذوبان.
يبدأ هذا الراسب في التكون حول الخلايا البكتيرية ويتبلور إلى كالسيت ، وهو شكل بلوري مستقر.
تستقر هذه البلورات على شكل رواسب بيضاء في الجزء السفلي من الأنبوب ، مما يدل على ترسيب الكالسيت الناجم عن الميكروبيولوجيا ، أو MICP.
انقل تسعة ملليلتر من المزرعة السائلة المحضرة إلى عدة أنابيب طرد مركزي معقمة سعة عشرة ملليلتر. قم بإعداد 100 مل من محلول مخزون التخصيب الخارجي باستخدام ميزان تحليلي لقياس جرامين لكل لتر من اليوريا بعناية ، وجرام واحد لكل لتر من كلوريد الأمونيوم ، و 212 ملليجراما لكل لتر من بيكربونات الصوديوم ، و 280 ملليغرام لكل لتر من كلوريد الكالسيوم.
في دورق بوسط طازج ، اخلطي جميع المكونات ما عدا اليوريا والأوتوكلاف. بعد التعقيم ، اخلطي اليوريا مع مليلتر واحد من الوسط الطازج ومرري المحلول عبر حقنة مزودة بفلتر 0.2 ميكرومتر قبل إضافته إلى وسط التخصيب. أضف مليلترا واحدا من وسط التخصيب مع إضافات إلى أنابيب الطرد المركزي المعقمة التي تحتوي على تسعة ملليلتر من المزرعة المحضرة.
دوامة كل أنبوب واحتضان في حاضنة غير مهتزة عند 30 درجة مئوية. مراقبة جميع الوحدات بانتظام لبدء هطول الأمطار.