موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 3:16 دقيقة • September 26th, 2025
ابدأ بعينة ماء تحتوي على بكتيريا محمولة بالماء ، وقم بتصفيتها لإزالة الحطام.
انقل المرشح المخفف إلى ألواح أجار منخفضة المغذيات ، كل منها مكمل بمضاد حيوي معين. انشر المرشح واحتضان.
تنمو البكتيريا التي تحمل جينا محددا لمقاومة المضادات الحيوية على ألواح المضادات الحيوية المقابلة وتشكل مستعمرات.
عد المستعمرات لتحديد وحدات تشكيل المستعمرة (CFUs), تمثل عدد البكتيريا المقاومة للمضادات الحيوية.
حدد مستعمرة واحدة من كل طبق وقم بتعليقها في ماء مقطر معقم.
قم بتسخين المعلق لتحلل الخلايا وإطلاق محتويات داخل الخلايا ، بما في ذلك الحمض النووي البكتيري الذي يحتوي على جين مقاومة المضادات الحيوية.
قم بالطرد المركزي للأنابيب لفصل الحطام وجمع المادة الطافية التي تحتوي على الحمض النووي.
أضف كواشف تضخيم إلى الحمض النووي المستخرج.
ضع الأنابيب في جهاز تدوير حراري وقم بتشغيل البرنامج لتضخيم منطقة معينة من الحمض النووي البكتيري.
الحمض النووي المضخم جاهز لتحليل التسلسل لتحديد جين مقاومة المضادات الحيوية.
قم بمعالجة عينة الماء بشكل معقم عن طريق تصفيتها من خلال قطعة قماش موسلين معقمة لإزالة أي جسيمات. بعد ذلك ، قم بتخفيف عينة الماء المفلترة بشكل متسلسل لمزيد من التحليل. لتحديد عدد البكتيريا المقاومة للمضادات الحيوية ، أضف المضادات الحيوية بشكل منفصل في أنابيب تحتوي على 20 مل من أجار R2A المنصهر المعقم المعدل عند 40 درجة
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية