نظام زراعة مشتركة لدراسة الاستجابات الجزيئية لمضيفات النبات والبكتيريا المتفاعلة

خذ خزانا يحتوي على وسط نمو معقم مع درجة حموضة حمضية.

انقل شاشة شبكية مع شتلات نباتية إلى الخزان.

أغلقه بغطاء وشريط مسامي للحفاظ على التعقيم مع السماح بالتبادل الغازي.

احتضان بالرج لتهوية الوسط.

افحص الوسيط للتحقق من عدم وجود غيوم ، مما يشير إلى عدم وجود تلوث بكتيري.

ضع عينة على صفيحة مزرعة واحتضنها لملاحظة نقص نمو البكتيريا ، مما يؤكد عدم وجود بكتيريا ملوثة.

التلقيح ب Agrobacterium ، وهو مسببات أمراض نباتية ، واحتضن.

تعمل جزيئات الإشارات المشتقة من الجذور النباتية ودرجة الحموضة الحمضية على تنشيط بروتين مستشعر مرتبط بالغشاء البكتيري.

يؤدي التنشيط إلى التعبير الجيني ، مما ينتج عنه بروتينات للارتباط البكتيري بأسطح الجذور.

بعد التعلق ، تقوم Agrobacterium بتوصيل جزء من الحمض النووي ، يعرف باسم نقل الحمض النووي (T-DNA) ، إلى الخلايا النباتية عبر نظام إفراز.

عند الاندماج في جينوم النبات ، يقوم T-DNA بتصنيع جزيئات الإشارات التي تعزز الاستعمار البكتيري.

في غطاء تدفق معقم ، صب 18 مل من وسط MS السائل المعقم في خزانات زجاجية أسطوانية معقمة بأغطية معقمة.

بعد ذلك ، استخدم ملقطا معقما لنقل كل مربع شبكي برفق مع شتلات عمرها من 10 إلى 14 يوما من طبق بتري من الوسط شبه الصلب إلى خزان أسطواني مائي. الشتلات الموضحة هنا هي البرسيم. أغلق الأغطية على الخزانات باستخدام شريط جراحي مسامي.

ثم قم بزراعة الشتلات عند 22 إلى 2