تحضير وتحريض مزارع Borrelia burgdorferi لإنتاج الجسيمات الفيروسية
موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 3:17 دقيقة • September 26th, 2025
ابدأ بزراعة سلالة معدلة وراثيا من Borrelia burgdorferi ، وهي بكتيريا مسببة للأمراض.
تحمل هذه السلالة الحمض النووي للعاثيات الخاملة المدمجة في جينومها ، والذي تم تصميمه ليشمل جينا مستهدفا يمنح مقاومة للمضادات الحيوية.
أضف المضاد الحيوي المقابل واحتضن الثقافة. يعبر جين مقاومة المضادات الحيوية عن بروتين يثبط المضاد الحيوي ، مما يضمن تكاثر البكتيريا التي تؤوي الجين فقط.
بمجرد أن تصل المزرعة إلى الكثافة المطلوبة ، قم بطرد الخلايا للتخلص منها والتخلص من المادة الطافية.
أعد تعليق الحبيبات ، وأدخل محفزا كيميائيا ، واحتضان للحث على تلف الحمض النووي.
تستئصل استجابة إصلاح الحمض النووي الناتجة الحمض النووي للعاثية ، وتبدأ في تكاثرها ، والتعبير عن البروتينات الهيكلية ، وتجميع فيروسات جديدة تحمل جين مقاومة المضادات الحيوية.
قم بالطرد المركزي للثقافة مرة أخرى ، وتخلص من المادة الطافية ، وأعد تعليق الخلايا في وسط جديد.
الخلايا البكتيرية التي تحتوي على فيريونات ناضجة جاهزة لمزيد من التطبيقات النهائية.
قم بتلقيح 150 ميكرولتر من استنساخ Borrelia burgdorferi المناسب في 15 مل من BSK في أنابيب طرد مركزي مخروطية معقمة مغطاة بإحكام لبروتوكول النقل. بعد ذلك ، استكمل الوسط بالتركيز المناسب للمضادات الحيوية أو مزيج من المضادات الحيوية لاختيار وصيانة الحمض النووي غير المتجانس داخل استنساخ Borrelia burgdorferi واحتضان
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية