الفحص المجهري لتباين الطور لتقييم الطفرات التنموية في Streptomyces
موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:44 دقيقة • September 26th, 2025
ابدأ بألواح أجار تحتوي على مستعمرات من سلالات من النوع البري والطافرة من Streptomyces coelicolor ، وهي بكتيريا تربة خيطية.
ضع غطاء معقما فوق منطقة من نمو المستعمرة الكثيفة حيث تكون الخيوط الهوائية ، وهي خيوط تمتد فوق سطح المستعمرة ، مرئية بوضوح.
اضغط برفق على غطاء الغطاء لنقل الخيوط الهوائية والجراثيم المرتبطة بها إلى سطح الغطاء.
بعد ذلك ، خذ شريحة مجهر مع وسائط التثبيت وقم بتركيب جانب الخلية لأسفل للحفاظ على الهياكل البكتيرية.
ضع الشريحة على مرحلة المجهر ، وأضف قطرة من زيت الغمر على الغطاء ، وقم بمحاذاة الهدف.
باستخدام الفحص المجهري لتباين الطور ، احصل على صور للخيوط الهوائية من كل من السلالات البرية والمتحولة.
تظهر الخيوط من النوع البري جراثيم ذات حجم موحد ومتباعدة بانتظام.
في المقابل ، تظهر السلالات الطافرة عيوبا ، مثل الخيوط المنتفخة أو الجراثيم غير المنتظمة أو الجراثيم المتحللة ، مما يكشف عن اختلافات النمط الظاهري التنموي بين النوع البري والطفرات.
لتحضير رفع غطاء لنمو البكتيريا ، استخدم ملاقط معقمة لالتقاط غطاء معقم ووضع الغطاء على صفيحة أجار MS حيث يكون نمو البكتيريا كثيفا. باستخدام الملقط ، اضغط برفق على الجزء الخلفي من الغطاء لضمان نقل كاف للجراثيم البكتيرية والفطريات الهوائية. التقط الغطاء من اللوحة وضعه بزاوية 45 درجة بحيث تواجه مادة الخلية سطح شريحة مجهر تحتوي على قطرة 15 ميكرول
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية