موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:05 دقيقة • September 26th, 2025
ابدأ بأنبوب معقم يحتوي على وسط نمو خاص بالمضيف. أضف مزرعة بكتيرية مضيفة مزروعة بين عشية وضحاها.
بعد ذلك ، أدخل مرشحا يحتوي على بكتيريا السكرية ، وهي بكتيريا طفيلية صغيرة جدا ، لإنشاء مزرعة ثنائية.
احتضان المزرعة الثنائية في ظل ظروف ميكروهوبية مثالية للبكتيريا المضيفة.
تعزز العناصر الغذائية الموجودة في الوسط نمو وتكاثر البكتيريا المضيفة ، مما يجعل الثقافة عكرة.
نظرا لطبيعتها الطفيلية الملزمة ، تلتصق البكتيريا السكرية بسطح الخلايا البكتيرية المضيفة.
ثم تشكل هذه البكتيريا اتصالات غشائية وثيقة مع المضيف وتستخرج العناصر الغذائية الضرورية لبقائها وتكاثرها.
مع تقدم العدوى ، يتباطأ نمو المضيف البكتيري ، مما يؤدي إلى تقليل التعكر.
لدعم النمو المستمر ، انقل الثقافة الثنائية إلى وسط جديد على فترات منتظمة.
هذا يحافظ على قابلية المضيف للبقاء ويعزز الاستقرار طويل الأجل للثقافة الثنائية.
قم بإعداد أنابيب الاستزراع عن طريق إدخال ملليلترين من وسائط النمو المناسبة في الأنابيب.
بعد ذلك ، أضف 200 ميكرولتر من الثقافة الليلية للكائنات المضيفة و 100 إلى 200 ميكرولتر من العينة المفلترة المعلقة إلى كل أنبوب. احتضان العينات المجمعة في ظل ظروف مناسبة للكائن الحي المضيف. قم بتمرير الخلايا كل يومين إلى ثلاثة أيام عن طريق نقل 200 ميكرولتر من المزرعة الثنائية إلى ملليلتر من وسط النمو الجديد في أنبوب جديد.
إذا لم تظهر الثقافات التي تم تمريرها أي نمو عند 200 ميكرولتر من المزرعة المضيفة غير المصابة ، عند تمرير الخلايا ، أعد الأنابيب الملقحة إلى الحاضنة.