التحقيق في الاستجابة البكتيرية للإيثيلين باستخدام مركب يطلق الإيثيلين

ابدأ بصفيحة متعددة الآبار تحتوي على وسائط نمو ملقحة مسبقا بالبكتيريا المنتجة للسليلوز.

في البئر المعالج ، يتم استكمال الوسائط بحمض 2-كلورو إيثيل فوسفونيك (CEPA).

أغلق اللوحة لمنع تبادل الغازات واحتضانها.

أثناء الحضانة ، يتحلل CEPA ويطلق الإيثيلين ، وهو جزيء غازي.

ينشط الإيثيلين سينسيز السليلوز البكتيري ، والذي يستخدم العصارة الخلوية UDP-glucose لتصنيع السليلوز.

بمرور الوقت ، تقوم البكتيريا ببثق السليلوز من خلال غشاءها.

هذا يعزز التجميع الذاتي للبكتيريا في واجهة الهواء والسائل ، مكونا غشاء حيوي عائم قائم على السليلوز ، أو بيليك.

بعد الحضانة ، انقل الحبيبات إلى طبق جديد متعدد الآبار. أضف محلولا قلويا واحتضان عند درجة حرارة أعلى لتحلل الخلايا.

قم بإزالة المحلول القلوي. اغسل بشكل متكرر بالتحريض لإزالة الحطام الخلوي مع الاحتفاظ بالسليلوز.

جفف ووزن الحبيبات. يشير الوزن الجاف المرتفع في العينات المعالجة ب CEPA مقارنة بالعنصر الشاهد إلى زيادة إنتاج السليلوز البكتيري استجابة للإيثيلين.

اختبار الحبيبات هو أداة تحليل قياسية لإنتاج السليلوز البكتيري. يتم تفصيل الرقم الهيدروجيني والتحليل المورفولوجي في بروتوكول النص. في التحضير ، قم بحصاد الخلايا من الثقافات البادئة في ثلاث نسخ وتحديد الخلايا باستخدام غرفة عد بتروف هاوزر.

بعد ذلك ، قم بإعداد أربعة خلطات رئيسية متوسطة بتركيزات مختلفة من CEPA. لكل مزيج رئيس