امتصاص الحمض النووي الناجم عن الكفاءة في المكورات العنقودية الذهبية

خذ مزرعة المكورات العنقودية الذهبية الحساسة للمضادات الحيوية كلورامفينيكول.

جهاز طرد مركزي لإزالة البكتيريا وإزالة المادة الطافية.

انقل الحبيبات إلى أنبوب يحتوي على وسائط تحد من المغذيات واحتضانها. يعزز الإجهاد الغذائي الكفاءة - قدرة البكتيريا على استيعاب الحمض النووي الأجنبي.

قم بالطرد المركزي مرة أخرى وإزالة المادة الطافية. أعد تعليق الحبيبات في وسائط جديدة تحد من العناصر الغذائية.

بعد ذلك ، أضف الحمض النووي المستخرج من S. aureus سلالة تحمل جينا مقاوما للكلورامفينيكول. حضن.

تقوم آلية امتصاص الحمض النووي بمعالجة الحمض النووي إلى خيط واحد ونقله إلى السيتوبلازم ، حيث يندمج في الكروموسوم البكتيري.

جهاز طرد مركزي وإزالة المادة الطافية. أعد تعليق الحبيبات في وسائط غنية بالمغذيات.

انقل المعلق إلى أجار غني بالمغذيات المنصهرة يحتوي على الكلورامفينيكول.

يسكب المزيج في طبق ويحتضن.

يشير نمو المستعمرات المقاومة للكلورامفينيكول إلى امتصاص الحمض النووي بنجاح.

قم بزراعة الخلية المتلقية بين عشية وضحاها ، في خمسة ملليلتر من TSB عند 37 درجة مئوية مع الاهتزاز. في صباح اليوم التالي ، انقل 0.5 مل من المزرعة الليلية إلى أنبوب 1.5 ملليلتر.

ترسب الخلايا عن طريق الطرد المركزي. ثم الخلايا ب 10 ملليلتر من CS2 وسط في أنبوب 50 مل. بعد ذلك ، قم بزراعة البكتيريا عند 37 درجة مئوية مع الاهتزاز عند 180 دورة في الدقيقة لمدة ث