موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 3:27 دقيقة • September 26th, 2025
ابدأ بمزرعة الإشريكية القولونية المعالجة مسبقا بمضاد حيوي.
يمنع هذا المضاد الحيوي انقسام الخلايا ، مما يؤدي إلى تكوين خلايا خيطية ممدودة مع زيادة محتوى الحمض النووي.
ضع جزءا من المزرعة على طبق أجار غني بالمغذيات واحتضانها.
الخلايا الخيطية لا تنقسم على الرغم من النمو المستمر ؛ فقط الخلايا غير الخيطية تشكل مستعمرات ، مما يؤدي إلى انخفاض عدد المستعمرات.
خفف المزرعة البكتيرية المتبقية وأضف صبغة مرتبطة بالحمض النووي الفلوري. ثم احتضن في الظلام.
تدخل الصبغة الخلايا وترتبط بالحمض النووي.
دوامة العينة ثم مررها عبر مقياس التدفق الخلوي.
كمية الضوء المتناثر من كل خلية تتوافق مع حجمها.
وبالمثل ، يشير التألق المنبعث من الأحماض النووية المرتبطة بالصبغة إلى محتوى الحمض النووي البكتيري.
تظهر الخلايا المعالجة بالمضادات الحيوية زيادة في التشتت والمضان ، مما يعكس النمو الخيطي واستمرار تكرار الحمض النووي دون انقسام.
يوضح هذا تعديلات في فسيولوجيا البكتيريا الناجمة عن المضادات الحيوية المثبطة لانقسام الخلايا.
قم بإعداد تخفيفات تسلسلية بعشرة أضعاف ، حتى 10 إلى سابع ناقص ، من 200 ميكرولتر من عينة المزرعة في وسط طازج.
امزج بين كل تخفيف عن طريق دوامة لطيفة جدا أو عن طريق قلب الأنبوب. صفيحة 100 ميكرولتر من التخفيف المناسب على ألواح الاغاروز LB غير المختارة واحتضان طوال الليل عند 37 درجة مئوية. في اليوم التالي ، احسب عدد
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية