موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:09 دقيقة • September 26th, 2025
ابدأ بصفيحة مزرعة تحتوي على عينة من سلالة بكتيرية.
باستخدام إبرة تلقيح معقمة ، اختر مستعمرة معزولة.
في ظل ظروف معقمة ، قم بتلقيح هذه المستعمرة في وسط شبه صلب مكمل بصبغة أكسدة اختزال عديمة اللون. يقيد الوسط شبه الصلب الانتشار السلبي للبكتيريا.
قم بإعداد أنابيب التحكم ، والتحكم السلبي مع سلالة بكتيرية غير متحركة تفتقر إلى السوط ، وتحكم إيجابي مع سلالة بكتيرية شديدة الحركة وسوط.
احتضان جميع الأنابيب الملقحة لدعم نمو البكتيريا وحركتها.
أثناء الحضانة ، تقلل البكتيريا النشطة أيضيا من صبغة الأكسدة والاختزال عديمة اللون إلى منتج أحمر اللون غير قابل للذوبان.
تتكاثر البكتيريا المتحركة وتهاجر عبر الوسط شبه الصلب باستخدام سوطها ، مما يخلق منطقة حمراء منتشرة تشع إلى الخارج في الوسط المحيط.
تتكاثر البكتيريا غير المتحركة ولكنها لا تهاجر. لا تزال المنطقة الحمراء محصورة في موقع الثقب.
يتيح ذلك التمييز البصري للسلالات البكتيرية غير المتحركة والحركة.
اختر مستعمرات مفردة من البكتيريا من ألواح أجار وقم بتلقيحها في كل من الوسائط شبه الصلبة عن طريق ثقبها باستخدام إبر التلقيح. تذكر تضمين السلالات غير المشروطة كعناصر تحكم سلبية وسلالات مشروطة كعناصر تحكم إيجابية.
احتضان الأنابيب عند 37 درجة مئوية ولاحظ النتائج بعد 24 إلى 48 ساعة من الحضانة. إذا كان خط الثقب فقط أحمر ، فقم بتمييز البكتيريا بأنها غير مشروطة.
إذا انتشر اللون الأحمر للخارج على طول خط الثقب ، فقم بتمييز البكتيريا على أنها مشروطة.