موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 1:28 دقيقة • October 30th, 2025
خذ مزرعة من Corynebacterium glutamicum ، المحولة باستخدام بلازميد يحمل جين مراسل الفلورسنت في اتجاه مجرى النهر من الحمض النووي الريبي المضاد للإنهاء أو تسلسل RAT ، في صفيحة متعددة الآبار.
أثناء النسخ ، يشكل RAT-RNA بنية حلقة جذعية تمنع بوليميراز الحمض النووي الريبي ، مما يوقف التعبير الجيني للمراسل.
يعبر البلازميد أيضا بشكل أساسي عن LicV ، وهو بروتين اندماج يشتمل على بروتين ربط RAT-RNA ، LicT ، ومجال VVD الحساس للضوء الأزرق.
في الظلام ، يظل LicV أحادي اللون ولا يرتبط بالحلقة الجذعية RAT-RNA ، والتي تمنع نسخ جين المراسل.
قم بإضاءة المزرعة بالضوء الأزرق لإحداث تغيير توافقي في مجال VVD ، مما يؤدي إلى تثنية LicV.
يرتبط LicV الثنائي ب RAT-RNA ، مما يكشف عن بنية الحلقة الجذعية ويسمح لبوليميراز الحمض النووي الريبي بنسخ جين المراسل ، مما ينتج عنه بروتين المراسل الفلوري.
راقب الثقافة تحت مجهر الفلورة.
يؤكد التألق القوي للمراسل بعد إضاءة الضوء الأزرق والحد الأدنى من التألق في الظلام التحكم البصري الوراثي الناجح.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية