قياس السعرات الحرارية الدقيقة متساوية الحرارة لمراقبة نشاط التمثيل الغذائي في البكتيريا
موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 1:27 دقيقة • October 30th, 2025
خذ التخفيفات التسلسلية للثقافة البكتيرية وأضف الكميات المنخفضة إلى قوارير السعرات الحرارية التي تحتوي على وسط النمو.
قم بتحميل القوارير المختومة في لوحة متعددة الآبار لمقياس السعرات الدقيقة متساوي الحرارة لقياس إنتاج الحرارة الأيضية.
يتم الاحتفاظ بالجهاز عند درجة حرارة ثابتة لضمان أن الحرارة المكتشفة تنشأ فقط من التمثيل الغذائي البكتيري.
عندما تقوم البكتيريا باستقلاب العناصر الغذائية وتتكاثر ، فإنها تطلق الحرارة التي تكتشفها المستشعرات في الوقت الفعلي.
في موازاة ذلك ، احتضان قوارير متطابقة في حاضنة. باستخدام مقياس الطيف الضوئي ، قم بقياس الكثافة الضوئية (OD) لمراقبة نمو البكتيريا.
باستخدام إشارات القياس الحراري من التخفيفات ، قم ببناء منحنى نشاط حراري وربطه بقيم OD.
تشير الذروة الأولى الحادة إلى التنفس الهوائي أثناء النمو الأسي.
عندما يصبح الأكسجين محدودا ، تتحول الخلايا إلى التخمير اللاهوائي ، مما ينتج عنه ذروة حادة ثانية.
عند الدخول في المرحلة الثابتة ، تفرز البكتيريا إنزيمات لتحلل البروتينات خارج الخلية والحفاظ على التمثيل الغذائي ، مما ينتج عنه ذروة واسعة.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية