JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدات • 2:52 د • October 30th, 2025
ابدأ بتلقيح معلق من البكتيريا المختزلة للمعادن في وسط ثقافة بأيونات معدنية.
احتضان مع التناوب لتعزيز النمو وتسهيل امتصاص أيونات المعادن.
تنتشر أيونات المعادن في الخلايا ويتم اختزالها إنزيميا إلى أكاسيد معدنية غير قابلة للذوبان.
تفرز هذه الأكاسيد وتنوي بالقرب من الغشاء البكتيري ، حيث تتجمع ذاتيا في كبسولات دقيقة لأكسيد المعدن الصلب خارج الخلايا.
بعد الحضانة ، قم بموجات فوق الصوتية المعلق لفصل البكتيريا عن الكبسولات الدقيقة.
قم بالطرد المركزي للخليط لحبيبات الكبسولات الدقيقة الكثيفة والتخلص من المادة الطافية.
اغسل الحبيبات بالماء ، ثم قم بتموجات فوق الصوت. جهاز طرد مركزي مرة أخرى لفصل البكتيريا عن الكبسولات الدقيقة.
بعد ذلك ، أضف الإيثانول لتقليل التوتر السطحي.
الموجات فوق الصوتية مرة أخرى لطرد أي بكتيريا متبقية وتفريق الكبسولات الدقيقة.
قم بالطرد المركزي مرة أخرى وتخلص من المادة الطافية.
كرر غسل الإيثانول.
أخيرا ، أغلق الأنابيب لمنع جفاف وتشوه الكبسولات الدقيقة المنقاة.
استرجع المزرعة التي تحتوي على البكتيريا وحيدة النسيلة وأضف 50 ميكرولتر منها إلى كل من أنابيب الطرد المركزي العشرة سعة 50 مليلترا التي تحتوي على وسائط تنجستات الصوديوم.
احتضان الأنابيب العشرة في حاضنة 37 درجة مئوية لمدة 120 ساعة. بعد الحضانة ، ضع كل أنبوب في جهاز الموجات فوق الصوتية وقم بصوتنة الخلايا بسرعة 20 كيلوهرتز مع 150 واط لمدة ساعة واحدة.
قم بالطرد المركزي للأنابيب ثم قم بإزالة السائل الصافي باستخدام ماصة.
بعد ذلك ، أضف الماء ثم صوتنة وأجهزة طرد مركزي للأنابيب مرة أخرى.
بعد الطرد المركزي الثاني ، قم بإزالة السائل الصافي في الأنابيب باستخدام ماصة.
ثم أضف 35 ملليلتر من 99.8٪ إيثانول وقم بالموجات فوق الصوتية للعينات مرة أخرى.
شطف المعادن عن طريق الطرد المركزي لها, إضافة الكحول, وصوتنة العينة مرة أخرى.
بعد ذلك ، قم بإزالة السائل الصافي الموجود في الأنابيب باستخدام ماصة وقم بتغطية الأنابيب على الفور دون تجفيف العينة.