موسوعة JoVE للتجارب
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدة • 2:49 دقيقة • October 30th, 2025
خذ ثقافة مخزون من Bacillus mycoides ، وهو جذر معزز لنمو النبات ، وقم بوضع لقاح على صفيحة مزرعة.
احتضان اللوحة لتعزيز تكاثر البكتيريا في المستعمرات.
تلقيح مستعمرة واحدة في وسط سائل واحتضان مع الاهتزاز لتعزيز نمو البكتيريا.
قم بتخفيف المزرعة باستخدام الوسط السائل لتحقيق الكثافة المثلى للمقايسة.
أضف إفرازات جذر البطاطس إلى المزرعة لمحاكاة تفاعلات النبات والميكروب.
احتضان الثقافة مع التحريض ، مما يسهل تفاعل جزيئات الإشارات مع المستقبلات البكتيرية.
يحفز هذا التفاعل مسارات الإشارات التي تنشط البروتينات التنظيمية ، والتي ترتبط بالحمض النووي وتغير التعبير الجيني.
انقل المزرعة إلى أنبوب وقم بتدوير الخلايا البكتيرية إلى حبيبات.
تخلص من المادة الطافية واغمس الأنبوب في النيتروجين السائل لتجميد الخلايا بشكل سريع.
قم بتخزين الخلايا لتحليل التغيرات التي يسببها إفرازات جذر النبات في التعبير الجيني البكتيري.
لزراعة البكتيريا ، قم بوضع سلالة B. mycoides من مخزون الجلسرين تحت الصفر 80 درجة مئوية على صفيحة أجار LB ، واحتضن اللوحة عند 30 درجة مئوية طوال الليل. ثم قم بتلقيح الوسط السائل LB بمستعمرة واحدة من اللوحة ، وقم بزراعة المزرعة في حاضنة اهتزاز عند 200 دورة في الدقيقة طوال الليل عند 30 درجة مئوية.
لعلاج البكتيريا وأخذ عينات منها ، قم بتخفيف مزرعة B. mycoides طوال الليل ب 90 مل من وسط LB المسخن مسبقا إلى OD60
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية