JoVE Encyclopedia of Experiments
علم الأحياء الدقيقة
0 مشاهدات • 2:14 د • October 30th, 2025
ابدأ بمستخلص خميرة تود هيويت المعقم ، أو صفيحة أجار THY ، وهي وسط غني بالمغذيات يدعم نمو التهاب العقدية ، وهي بكتيريا مسببة للأمراض.
باستخدام حلقة معقمة ، قم بربط اللوحة بالسلالة البكتيرية.
ضع الطبق الملقح في وعاء شمعة ، وأشعل شمعة ، وأغلق البرطمان بإحكام ، واحتضن.
تستهلك الشمعة المشتعلة الأكسجين وتزيد من مستويات ثاني أكسيد الكربون ، مما يخلق بيئة مجهولة تحاكي الظروف الشبيهة بالمضيف.
تعزز العناصر الغذائية الموجودة في الوسط والبيئة الهوائية الدقيقة للجرة تكاثر البكتيريا وتعزز تطوير النمط الظاهري للضراوة.
بعد الحضانة ، قم بإزالة غطاء البرطمان واسترجع اللوحة.
باستخدام حلقة معقمة ، اختر مستعمرة واحدة معزولة وانقلها إلى أنبوب مخروطي معقم يحتوي على مرق THY.
احتضان المزرعة في ظل ظروف ثابتة لدعم نمو البكتيريا مع الحفاظ على النمط الظاهري للضراوة.
يمكن استخدام هذه الثقافة كنموذج ممرض للتحقيق في تفاعلات المضيف والمسببات الممرضة.
قبل تحضير المكورات العقدية Mitis Group ، قم بتسخين ألواح أجار THY في حاضنة إلى 37 درجة مئوية.
بعد ذلك ، استخدم حلقة معقمة لإخراج السلالات المرغوبة من Streptococci على الألواح.
بعد ذلك ، ضع الأطباق في وعاء شمعة ، واحتضن البرطمان على حرارة 37 درجة مئوية طوال الليل لمدة 18 ساعة تقريبا لتوفير بيئة هوائية دقيقة.
في اليوم التالي ، قم بإزالة الألواح من جرة الشمعة واستخدم حلقة معقمة لاختيار مستعمرات معزولة.
تلقيح 15 مل أنابيب مخروطية معقمة تحتوي على 2 مل من مرق THY.
أغلق الأغطية بإحكام واحتضن الأنابيب عند 37 درجة مئوية في ظل ظروف ساكنة.