تزامن ثقافة البكتيريا الزرقاء وضغط الحمض النووي مدفوع بدورات الضوء والظلام

JoVE Encyclopedia of Experiments

علم الأحياء الدقيقة

0 مشاهدات • 3:17 د • October 30th, 2025

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ابدأ بطبق أجار غني بالمغذيات مكمل بثيوسلفات.

قم بربط البكتيريا الزرقاء واحتضان تحت فترات الضوء والظلام المتناوبة للحفاظ على الدورة اليومية.

خلال فترة الضوء ، يدعم امتصاص المغذيات وثيوسلفات نمو البكتيريا وتكثيف الحمض النووي.

في الفترة المظلمة ، تحافظ الخلايا على الطاقة وتنقسم.

تعمل دورة الضوء والظلام المتناوبة على مزامنة الخلايا مع نفس مرحلة النمو والانقسام.

بعد فترة الضوء ، أضف محلول السكروز والماصة بشكل متكرر لإطلاق البكتيريا الزرقاء ، مما يتسبب في تغير اللون. نقل الخلايا إلى أنبوب.

أضف صبغة فلورية خاصة بالحمض النووي واحتضن في الظلام. ترتبط الصبغة بالحمض النووي للبكتيريا الزرقاء.

جهاز طرد مركزي لفصل البكتيريا الزرقاء وإزالة المادة الطافية.

أعد تعليق البكتيريا الزرقاء في محلول السكروز ، وانقل المعلق إلى شريحة ، وقم بتغطيته.

تحت مجهر مضان ، يؤكد الحمض النووي الأزرق المكثف في الخلايا التقدم المتزامن والمنظم بالساعة البيولوجية لدورة الخلية البكتيرية الزرقاء.

ابدأ بزراعة البكتيريا الزرقاء على ألواح BG-11 المعقمة التي يبلغ طولها تسعة سنتيمترات تحتوي على 1.5٪ أجار و 0.3٪ ثيوسلفات الصوديوم. احتضان الصفائح عند 23 درجة مئوية تحت دورة ضوئية 12-12 مع 50 ميكرو من الضوء لكل متر مربع في الثانية. للحفاظ على الخلايا ، قم بنقلها إلى ألواح أجار BG-11 جديدة أسبوعيا.

في غضون أسبوع واحد ، تظهر الثقافات على شكل أشرطة خضراء. انقل كتل الخلايا الخضراء باستخدام حلقة معقمة باللهب ، وقم بوضعها على اللوحة الجديدة. لمراقبة ضغط الحمض النووي ، اجمع الخلايا المزروعة لمدة ستة أيام في نهاية فترة الضوء.

لتحرير الخلايا من الصفيحة ، أضف مليلتر واحد من السكروز 0.2 مولار. بعد ذلك ، اجمع معلق الخلية ، وكرر إضافة السكروز وإزالته حتى يتحول المحلول إلى اللون الأخضر. يشير تغيير اللون إلى أن معظم الخلايا قد تم إطلاقها.

الآن ، انقل 500 ميكرولتر من محلول الخلايا العالقة إلى أنبوب Microfuge ، وأضف صبغة Hoechst للحصول على تركيز نهائي يبلغ ميكروغرام واحد لكل مليلتر. ثم دع الخلايا تحتضن في الظلام لمدة 10 دقائق. بعد ذلك ، قم بتدوير الخلايا ، وتخلص من المادة الطافية ، وأعد تعليقها في 10 ميكرولتر من السكروز 0.2 مولار.

بعد ذلك ، انقل ميكرولتر واحد من المعلق إلى شريحة زجاجية ، وقم بوضع زلة غطاء ، وراقب الخلايا تحت مجهر مضان مزود بفلتر للأشعة فوق البنفسجية. باستخدام هدف غمر الزيت 100 مرة ، ابحث عن دليل على ضغط الحمض النووي ، والذي يجب ملاحظته في معظم الخلايا.

10:57

بروتوكول تجريبي للكشف البكتيريا الزرقاء في العينات السائلة والصلبة مع الأجسام المضادة ميكروأري رقاقة

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

07:51

تحديد نوع الخلايا العصبية مع أوبترودي زجاج في الفئران مستيقظا أوبتوجينيتيكس

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:37

التخمير الذي يتم التحكم فيه بالضوء لإنتاج المواد الكيميائية والبروتين الميكروبي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

02:01

تحضير ثقافة البكتيريا الزرقاء لإنتاج الكتلة الحيوية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:02

تزامن العنيقاء Crescentus للتحقيق في دورة الخلية البكتيرية

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

11:13

تصميم وتنفيذ لإلقاء الضوء الآلي، التثقيف، ونظام أخذ العينات للتطبيقات الميكروبية علم البصريات الوراثي

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

09:47

التصور للضغط الحمض النووي في البكتيريا الزرقاء بالتصوير المقطعي الفولت العالي Cryo-إلكترون

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

08:25

التحوير الجيني لبكتيريا السيانيد بالاقتران باستخدام مجموعه أدوات الاستنساخ النموذجية السيسونات

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

05:21

تشغيل المفاعلات الحيوية الضوئية المختبرية مع قياسات النمو عبر الإنترنت وأنظمة الضوء القابلة للتخصيص

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

06:26

عزل وتوصيف الفيكوبيليسوم السليم في البكتيريا الزرقاء

فيديوهات ذات صلة

0 مرات المشاهدة

آخر تحديث: 15 أغسطس 2026