القياس الكمي للقطبية وديناميكيات مكون نظام الإفراز في الفيلقية الرئوية

ابدأ ب Legionella pneumophila ، وهو عامل أمراض تنفسي يعبر عن مكون نظام إفراز محدد بالفلورسنت مطلوب لعدوى المضيف.

لتحديد قطبية هذه المكونات ، احصل على صور مضان ، واضبط التباين لتمييز الخلايا الفردية.

ضع مناطق مستطيلة من قطب الخلية باتجاه السيتوبلازم لقياس التدرجات الفلورية.

قم بإخفاء هذه المناطق لاستخراج متوسط الشدة والتباين ، ثم احسب درجات القطبية كنسب شدة التباين إلى المتوسط.

تشير درجات القطبية العالية إلى التجنيد المستهدف للمكونات في الأقطاب البكتيرية.

للحصول على قياسات ديناميكية، التقط صورتين بفاصل زمني واضبط التباين لتصور الخلايا بوضوح.

ضع مناطق مربعة في مركز الخلية لقياس مضان العصارة الخلوية.

قم بإخفاء الخلايا بأكملها لتصحيح التبييض الضوئي وتحديد مناطق الخلفية بين الخلايا لطرح الضوضاء.

تصدير جميع الشدة وحساب التغيير في التألق بمرور الوقت.

تشير الكثافة المتزايدة إلى التجميع ، بينما تعكس الكثافة المنخفضة إعادة التوزيع الديناميكي لمكونات الإفراز داخل البكتيريا.

لقياس القطبية ، اضبط تباين الصورة بحيث تكون البكتيريا مرئية بوضوح.

ثم قم بتكبير المنطقة المعنية واستخدم أداة المنطقة لوضع مستطيل 0.25 × 1.3 ميكرومتر يبدأ من القطب ويمتد إلى السيتوبلازم ، مع التأكد من بقاء المستطيل داخل حدود البكتيريا.

ضع علامة على 200 بكتيريا على الأقل وقم بإنشاء أقنعة باستخدام زر المنطقة للإخفاء في قائمة التحليل. انق