المراقبة في الوقت الحقيقي لنمو البكتيريا باستخدام نظام زراعة القطرات الدقيقة الموائع الدقيقة

ابدأ بغرفة زراعة القطرات الدقيقة التي تحتوي على شريحة موائع دقيقة مع موصلات يتم التحكم فيها بواسطة المضخة لتدفق السوائل وإزالة النفايات.

ضع زجاجة كاشف تحتوي على معلق بكتيري مغطى بالزيت داخل الغرفة.

قم بتوصيل الأنبوب العلوي للزجاجة بمنفذ المضخة والأنبوب الجانبي بموصل رقاقة. أغلق الغرفة.

قم بتعيين معلمات منحنى النمو. ثم ابدأ توليد القطرات.

عندما يتقارب الزيت والتعليق البكتيري عند تقاطع T ، يكسر قص الزيت المرحلة البكتيرية المائية إلى قطرات دقيقة موحدة تغلف البكتيريا.

بعد توليد القطرات ، قم بإزالة الزجاجة ، وقم بتوصيل موصل الرقاقة بمنفذ المضخة ، وأغلق الغرفة.

عندما تمر كل قطرة عبر مسار الكشف ، يقيس مسبار الألياف الضوئية كثافته البصرية ، مما يمثل تركيز البكتيريا.

حرك القطرات الدقيقة ذهابا وإيابا للسماح بنمو البكتيريا.

بمرور الوقت ، تقيس الألياف الضوئية الكثافة البصرية للقطرة ، مما يولد منحنى نمو.

استخدم حقنة معقمة سعة 10 ملليلتر لحقن ثلاثة إلى خمسة ملليلتر من زيت MMC من إبرة المحقنة إلى الأنبوب الجانبي في زجاجة الكاشف. ثم قم بإمالة زجاجة الكاشف وتدويرها ببطء لجعل الزيت يتسلل بالكامل إلى الجدار الداخلي.

بعد حقن خمسة ملليلتر من محلول بكتيريا أولي في الزجاجة ، املأ زجاجة الكاشف عن طريق حقن خمسة إلى سبعة ملليلتر من زيت MMC. اسحب الموصل السريع المستقل A لزجاجة الكاشف وأدخل الموصل السريع A في الموصل السريع للزجاجة B لإكمال عملية حقن العينة. بمجرد الانتهاء من ذلك ، افتح باب غرفة التشغيل لوضع زجاجة الكاشف في الحمام المعدني.

اسحب الموصل C2 للشريحة والموصل السريع A لزجاجة الكاشف. قم بتوصيل موصل الأنبوب الجانبي لزجاجة الكاشف بالموصل C2 وموصل الأنبوب العلوي بموصل O2. ثم أغلق باب غرفة العمليات.

لاختيار وظيفة قياس منحنى النمو ، انقر فوق منحنى النمو. في واجهة إعداد المعلمة، أدخل الرقم ك 15. بعد ذلك ، قم بتشغيل مفتاح الكشف عن OD واضبط الطول الموجي على 600 نانومتر. انقر فوق علامة التبويب "ابدأ" لبدء توليد القطرات.

ستستغرق العملية 15 دقيقة حتى تكتمل.

عندما تظهر نافذة منبثقة على الواجهة الرئيسية تطالب برسالة ، افتح باب غرفة التشغيل لإخراج زجاجة الكاشف وتوصيل موصلات C2 و O2. بعد إغلاق الباب ، انقر فوق الزر "موافق" في النافذة المنبثقة لزراعة القطرات تلقائيا واكتشاف قيم OD.

عندما يصل منحنى النمو إلى المرحلة الثابتة ، انقر فوق تصدير البيانات زر لتصدير بيانات OD. حدد مسار حفظ البيانات وقم بتصدير قيمة OD المسجلة خلال فترة الزراعة بتنسيق dot CVS. لرسم منحنى النمو ، استخدم برنامج رسم الخرائط مثل Excel و Origin 9.0.